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Reglas Règles International Internacionales Internationales Rules for para pour Seed el les Testing Análisis Essais de las Semillas Semences 2018 2018 Internationale Vorschriften für die Prüfung von Saatgut 2017 Méthodes validées pour analyse sanitaire des Validated Seed Health Testing Methods semences Validierte Methoden zur Gesundheitsprüfung von Saatgut 7 016: Nachweis Détection Detection de of von complexe Phomopsis-Komplex de complex in an Glycine sur Samen semences max (soybean, von de Glycine soya max bean) max (Sojabohne) seed (soja) Incluye Inklusive Inclus Including les cambios Änderungen changes changements y correcciones and und editorial de redaktionelle règles corrections editoriales et Korrekturen adoptadas adopted éditoriales at verabschiedet en the la adoptées auf der lors Reunión Ordinary ordentlichen la General réunion Generalversammlung Anual Meeting annuelle 2016, 2017, générale Tallinn, Denver, 2017, Estonia 2017, USA Denver, États-Unis USA Gültig Effectives A partir ab del from 1. au 1 Januar de 1er 1 January enero janvier 2018 2017 2018

Règles Reglas Internationale Internationales Internacionales Rules Vorschriften for Seed pour para für les Testing el die Análisis Essais Prüfung de Semences von las Semillas Saatgut Validierte Méthodes Chapter Methoden validées 7: Validated pour zur Gesundheitsprüfung analyse Seed sanitaire Health Testing des von semences Methods Saatgut 7 016: : Nachweis Detection Détection of von de complexe Phomopsis-Komplex de complex in an Glycine sur Samen max von semences (soybean, Glycine soya de max Glycine bean) (Sojabohne) seed max (soja) Wirtspflanze: Hôte Host: : Glycine Glycine max (L.) max Merr. (L.) Merr. Krankheitserreger: Pathogen(s): Pathogène(s) : Phomopsis Phomopsis longicolla longicolla Hobbs, Diaporthe Hobbs, phaseolorum Diaporthe phaseolorum var. sojae sojae (Lehm.) var. (Lehm.) sojae Wehm. Wehm. (Lehm.) (Stade(Imper- fect P. state phaseoli P. phaseoli (Desm.) P. phaseoli Sacc., (Desm.) syn. (Desm.) Sacc., P. sojae Sacc., syn. Lehmann) P. syn. sojae P. ; Wehm. imparfait (Nebenfruchtform sojae Diaporthe Lehmann); Lehmann); phaseolorum Diaporthe Diaporthe phaseolorum (Cke. & Ell.) (Cke. Sacc. & f. Ell.) sp. caulivora Sacc. f. sp. (DPC), caulivora syn. (DPC), D. phaseolorum syn. D. phaseolorum var. caulivora var. caulivora Athow & Caldwell Athow & Caldwell Prepared Erstellt Auteurs durch: : R.R. by: International Walcott Seed Health Initiative for Field University Crops, of ISF Georgia, Athens GA 30602, États-Unis. Courriel : rwalcott@arches.uga.edu Author: Autoren: R.R. Walcott Préparé University par : of International Georgia, Athens Seed Health GA 30602, Initiative USA. Field E-Mail: Crops E-mail: rwalcott@arches.uga.edu Revisionsstand Historique history de la révision Version 1.0, 2003-01-01 Version 1.1, 2010-01-01: : redaktionelle Editorial Préparation change Änderungen l APDA to APDA : zur preparation: correction APDA de Vorbereitung: correction la pression of d autoclave Korrektur autoclaving des : pressure modification Version Autoklavierdruckes éditoriale 1.2, 2013-01-01: Definition of sample size Version 1.2, 1.3, 2013-01-01: 2014-01-01: : Definition Addition Définition of der positive la Probengröße taille control; de Version common l échantillon 1.3, 2014-01-01: name of host Positivkontrolle added hinzugefügt; Version deutscher 1.3, 1.4, 2014-01-01 2017-01-01: Name der Wirtspflanze : Ajout Reporting de contrôle results hinzugefügt positif revised; ajout Version de nom 1.4, commun 2017-01-01: de l hôte Berichterstattung der Ergebnisse überarbeitet 1.4, 2017-01-01 : «Indications des résultats» Version révisé Background Hintergrund Historique This method for the detection of Phomopsis seed decay in Soya beans uses direct plating on acidified potato dextrose agar Diese (APDA) Methode with zum visual Nachweis identification von Phomopsis-Samenfäule of subsequent fungal bei Cette growth. Sojabohnen méthode It de replaces nutzt détection die the direkte de original la pourriture Plattenkultur working des sheet semences auf publisherem due à Kartoffel-Dextrose-Agar Phomopsis in the ISTA sur Handbook soja utilise (APDA) of l ensemencement Seed bei Health visueller Testing direct Iden- in sau- November tifikation sur potato des dextrose 1964 anschließenden as agar S.3. acidifié No. 27 Pilzwachstums. (APDA) (Wallen, avec 1964) Sie identification das ursprüngliche visuelle and third de la editions croissance Methodenblatt, prepared mycélienne by veröffentlicht Kulik en résultant. (1981, im 1989). ISTA Elle and ersetzt the second This remplace Handbook version la of méthode of Seed the Health assay publiée contains Testing dans im several le November ISTA changes Handbook 1964 to the als on previous Seed S.3. No. Health 27 method (Wallen, Testing, descriptions 1964) novembre und following die 1964, zweite S.3 the und n o results 27 dritte (Wallen, Ausgabe, erstellt comparing et les seconde von two Kulik et methods (1981, troisième 1989). using éditions four Diese préparées replicates Version par der of of a 1964) study Kulik four Untersuchung seedlots (1981, in 1989). beinhaltet six independent Cette einige version Änderungen laboratories des tests zu in contient den Argentina, vorhergehenden modifications Methodenbeschreibungen. Canada, France par rapport and the aux USA Sie méthodes berücksichtigt (Walcott, décrites et al., die certaines Australia, précédemment 2003). Ergebnisse The einer changes suite Studie include: aux zum résultats the Vergleich use d une of zweier APDA étude comparant instead Methoden of 2 malt unter méthodes agar Nutzung or en amended utilisant von vier 4 water répétitions Wiederholungen agar; surface 4 lots von disinfestation de vier semences Saatgutpartien 16 % laboratoires NaOCl in sechs for unabhängigen indépendants 30 s instead Laboren of Argentine, 2 % for Argentinien, 10 Australie, min, fol- dans with Canada, lowed Australien, by France a 30 Kanada, s rinse et aux Frankreich in États-Unis sterile water; und (Walcott, den plates USA are et (Walcott al., incubated 2003). et Les in al., the 2003). modifications dark Die 25 Änderungen C comprennent for 7 d enthalten: before l utilisation evaluation. die Verwendung APDA von au lieu APDA du anstatt malt agar von ou Malz-Agar de l eau gélosée, oder modifiziertem la désinfection Wasser-Agar; die Oberflächendesinfektion mit 1 % NaOCl für de 30 s anstatt von 2 % für 10 min, mit anschließender Spülung für 30 s in sterilem Wasser; die Inkubation der Platten in Dunkelheit bei 25 C für 7 d vor der Auswertung. Behandeltes Treated seed(gebeiztes) Saatgut surface avec du NaOCl à 1 % pendant 30 s au lieu de of 2 % pendant 10 min, suivie d un rinçage pendant 30 s avec de l eau Saatgutbehandlungen Seed treatments stérile ; les may boîtes affect können sont the incubées die performance Aussagekraft à l obscurité of dieser this à test. 25 Methode should beeinflussen. only 7 jours performed avant Die la Untersuchung notation. on untreated sollte seed. nur mit unbe- C It pendant handeltem Saatgut durchgeführt werden. Semences Materials traitées Material Les Reference traitements material: peuvent reference affecter la cultures performance other de appropriate Elle ne devrait Referenzkulturen être appliquée que oder sur andere semences geeig- non la méthode. Referenzmaterial: Acidified traitées. nete Materialien PDA plates: 90 mm Petri dishes (one per ten APDA-Platten: seeds) 90 mm Petrischalen (eine Platte für 10 Incubator: Samen). operating at 25 ±2 C Sterile Inkubator: Materiel paper Betrieb towels: bei for 25 blotting ±2 C. seed dry Sterile Papierhandtücher: distilled/deionised water Für das Abtrocknen der Samen. 1 Steriles Matériel % NaOCl destilliertes/deionisiertes référence : cultures Wasser de référence ou autre Forceps 1 % matériel NaOCl (tweezers) approprié Timer Pinzetten Boîtes de PDA acidifié : boîtes de 90 mm de diamètre ph Zeitschaltuhr (une meter boîte pour 10 semences) ph-meter Étuve : capable de maintenir une température de 25 ±2 C Papier stérile : pour placer les semences à sec Sample Eau distillée/désionisée preparation Probenvorbereitung NaOCl 1 % It Pinces is vital to exclude any possibility of cross-contamination Es between Minuteur ist wichtig, seed samples. jede Möglichkeit This can be einer achieved Kreuzkontamination ph-mètre zwischen equipment den Samenproben and gloved auszuschließen. hands with 70 % Das ethanol. kann by swabbing/ spraying durch The Abtupfen/Besprühen test is carried out der on Ausrüstung a working sample und der of Handschuhe as mit described 70-prozentigem in Section Ethanol 7.4.1 erreicht of the werden. International 400 seeds Préparation Rules Der for Test Seed wird Testing. mit de einem l échantillon Probenumfang von 400 Samen durchgeführt wie es im Kapitel 7.4.1 der ISTA-Vorschriften Il beschrieben est essentiel ist. d exclure toute possibilité de contamination croisée Methods entre les échantillons de semences. Ceci peut être réalisé en essuyant ou pulvérisant les équipements avec de Methoden l éthanol Critical control à 70 %, points en utilisant are indicated des gants. by CCP. Le test est réalisé sur un échantillon de travail de 400 Kritische semences, 1. Pre-treatment: Kontrollpunkte comme décrit Gently sind dans rinse mit la seeds section KKP in gekennzeichnet. 7.4.1 NaOCl des solution Règles ISTA. (1 % available chlorine) for 30 s, then rinse for 30 s in 1. Vorbehandlung: sterile water. Blot Behutsam the seed dry die on Samen sterile in paper NaOCl-Lösung Plating: (1 % Using freies aseptic Chlor) technique, für 30 s, dann evenly für 30 space s in seeds steri- towels. 2.1 Méthodes lem on the Wasser surface spülen. of the Die acidified Samen PDA mit plates den sterilen (10 seeds Papierhandtüchern plate). abtrocknen. per Les 2.2 2.1 Ausplattieren: Positive points critiques control Unter de contrôle (reference sterilen sont Bedingungen material): indiqués par Aseptically werden CCP. die Samen place seeds gleichmäßig in an appropriate auf der Oberfläche number der of plates APDA-Plattetain (10 the Samen reference : je rincer Platte) culture, les ausgelegt. semences or plate a dans reference la solution culture de to ob- 1. Prétraitement 2.2 NaOCl Positivkontrollen on media. (chlore The number disponible (Referenzmaterial): of 1 plates %) pendant required Unter 30 will s et sterilen depend rincer pendant Bedingungen on the level 30 s dans of die contamination Samen l eau stérile. einer Les of entsprechenden the faire positive-control sécher sur Anzahl seed stérile. von lot. Petrischalen verteilen, um eine Referenzkultur papier 3. zu Incubation: erhalten oder Incubate eine Referenzkultur plates for 7 d at auf 25 dem ±2 C Medium in the auslegen. dark. 3. Inkubation: Die Platten für 7 d bei 25 ±2 C in Dunkelheit inkubieren. Gültig A Effectives partir ab del 11. 1January 1 er de janvier enero 2018 2017 7-016-3

Validierte Chapter Méthodes 7: Methoden validées Validated pour zur Seed Gesundheitsprüfung analyse Health sanitaire Testing Methods des von semences Saatgut Reglas Internationale Règles Internacionales Internationales Vorschriften International para pour für el les die Análisis Rules Essais Prüfung for de de Seed von las Semences Semillas Saatgut Testing 2.1 4. Kontrolle: Ensemencement Control: Subculture Eine Referenzkultur : disposer a reference aseptiquement auf culture einer onto APDA-Platte les semences a plate of subkultivieren bien acidified espacées PDA dans und and incubate mit chaque den boîte Testplatten with de the Pétri test inkubieren. sur plates. surface Alternatively, PDA kann acidifié a sample eine (10 Probe of semences seed von known Samen par boîte). to mit be bekannter infested may In- Alternativ du 2.2 fektion Contrôle be surface oberflächensterilisiert, positif sterilised, (matériel plated de on référence) auf acidified APDA : ausgelegt Placer PDA and les und semencecubated denselben under manière the Bedingungen same aseptique conditions et wie répéter die as the avec Untersuchungs- test un samples. nombre in- unter 5. proben approprié Examination: inkubiert de boîtes Examine werden. pour obtenir the plates culture after 3 de and référence, 7 d incubation déposer using une Die a culture dissecting Platten de sind microscope référence nach 3 und sur or 7 milieu. hand d Inkuba- lens Le 5. Auswertung: ou tion nombre at 5 unter to de 10 Verwendung boîtes magnification. requis eines dépend Compare Stereomikroskopes du niveau with de control contamination einer record Handlupe du the lot number de semences bei of 5 infected bis servant 10 seeds Vergrößerung de contrôle each plate. positif. zu prü- In- oder and 3. Incubation fen. fected Im seeds Vergleich : are incuber usually mit der les overgrown Referenzkultur boîtes pendant by a dense, ist 7 die jours white, Zahl à der 25 floccose ±2 infizierten C mycelium à l obscurité. Samen which auf jeder often Platte contains zu ermitteln. black, globose fruiting : repiquer Samen bodies sind une (pycnidia) üblicherweise culture and/or de référence mit black einem stromatic sur dich- une Die 4. infizierten Témoin ten, boîte bodies weißen, de (Fig. PDA flockigen 1). acidifié Pycnidia en Myzel même are usually überwachsen, temps short-beaked, que le welches dépôt des but oft schwarze, semences the length et kugelförmige of incuber the beak avec may Fruchtkörper les boîtes vary considerably. d essai. (Pyknidien) Par ailleurs, Spore und/ oder un exudate échantillon schwarze usually Stroma-Körper de accumulates semences as connu enthält a straw-yellow pour (Abb. être 1). Die droplet infecté Pyknidien pourrait at the tip sind être of gewöhnlich stérilisé the beak, en but surface, mit occasionally einem déposé kurzen sur in schnabelförmigefié a cirrhus. et incubé Fortsatz At dans high versehen, les magnification mêmes aber conditions die two Länge kinds que des of les Fortsatzes conidia échan- the PDA form acidi- of kann tillons may beträchtlich en seen. test. Alpha variieren. conidia Gewöhnlich are hyaline, tritt non-septate, ein Sporenexudat Lecture rounded : at observer in both Form ends les strohgelber boîtes (although après Tröpfchen some 3 et 7 jours may im d incuba- have oberen one 5. Bereich tion end more en utilisant der drawn Bohnen un out microscope aus, than gelegentlich the other), ou une auch straight loupe als à to Cirrhus. grossissemensoidal starker (Fig. 5 10. Vergrößerung 2, left), Comparer 4.5 11.0 können au témoin 1.5 3.5 2 Arten et noter µm. von le Konidien Beta nombre co- ellip- Bei gesehen de nidia semences are werden. long infectées and Die needle-shaped, Alpha-Konidien sur chaque sometimes boîte. sind Les hyalin, semences curved unseptiert, infectées hooked, hyaline, an sont beiden généralement 7.5 35.0 Enden gerundet recouvertes 0.8 1.8 (obwohl µm d un (Fig. mycélium einige 2, right). an or einem dense, The majority blanc, Ende mehr floconneux of pycnidia in die avec Länge produce souvent gezogen only des alpha sein éléments conidia, können de als fructification a few die produce anderen), noire alpha gerade globuleux conidia oder (pycnides) elliptisch with some (Abb. et/ou beta 2a), des conidia, stroma rarely noirs beta 1.5 3.5 (Fig. conidia 1). µm. Les are Die pycnides produced Beta-Konidien ont alone généralement (see sind also: lang un Mc- und col 4.5 11.0 nadelförmig, court, Gee, 1991)(CCP). mais la taille manchmal du col peut gebogen varier oder considérablement. hakenförmig, hyalin, L exsudat The long-beaked, 7.5 35.0 de conidies 0.8 1.8 black, s accumule µm globose (Abb. généralement 2b). perithecia Die Mehrheit en formant Diaporthe Pyknidien une gouttelette phaseolorum, bildet nur jaune the Alpha-Konidien, paille perfect à state l extrémité of bei Phomopsis wenigen du col, of der werden et phaseoli, occasionnellement Alpha-Konidien are not usually mit forme encountered einigen de cirrhe. Beta-Konidien plated A fort seeds grossissement, from lots werden produced 2 types in den in Fruchtkörpern conidies areas free peuvent of ausschließlich stem être canker. observées. As- Be- und selten ta-konidien Les cospores conidies are gebildet hyaline, alpha sont (siehe 1-septate hyalines, auch: but McGee, non may septées, 1991)(KKP). appear arrondies 3-septate, aux langschnäbligen, 2 extrémités with 1 2 drops (bien schwarzen, que in each certaines kugelförmigen half puissent of the spore, avoir Pe- to be Die rithezien une which extrémité is either von plus ellipsoidal Diaphorte allongée with phaseolorum, que the les ends autres), slightly der droites Hauptfruchtform ellipsoïdales ed and slightly von (Fig. to Phomopsis noticeably 2, gauche), phaseoli, constricted 4,5 11,0 treten at 1,5 3,5 the gewöhnlich septum, µm. point- à nicht Les 4.4 6.3 conidies auf Platten 1.6 2.1 beta mit sont µm ausgelegten longues to 8.6 11.8 et Samen forme 3.0 3.9 auf, d aiguille, die µm, aus or Partien parfois sometimes aus courbées Gebieten, broadly ou fusiform en frei forme von and Stängelkrebs, de then crochet, often stammen. hyalines, curved Die 7,5 35,0 with Askosporen no constriction 0,8 1,8 sind µm and hyalin, (Fig. obtuse 2, einfach droite). at each septiert, end, La majorité 7.5 10.5 bisweilen pycnides 2.0 2.7 dreifach µm. produisent septiert seulement vorkommend, des conidies mit 1 2 Tropfen alpha, peu in des jeder produisent Hälfte des der conidies Spore, die alpha von avec elliptischer quelques Form, conidies mit schwach beta, les conidies zugespitzten beta Enden sont rarement und schwach produites sichtbaren seules General Einschnürungen (voir aussi methods : McGee, am 1991)(CCP). Septum, 4.4 6.3 1.6 2.1 µm groß Les périthèces sind. Sie können de Diaporthe auch manchmal phaseolorum, breit spindelförmibuleux sein tolerances: avec und un dann long oft Tolerances col, gebogen, du stade ohne provide parfait Einschnürung a de means Phomopsis of und as- noirs, glo- Checking stumpf phaseoli, sessing an whether ne jedem sont Ende, or pas not fréquemment 7.5 10.5 the variation 2.0 2.7 trouvés in results µm. sur within essais de or between semences tests de lots are produits sufficiently dans wide des as zones to raise saines. doubts Les ascospores about the accuracy sont hyalines, of the avec results. 1 septa Suitable mais tolerances, semblent Allgemeine avoir which 3 can septae be avec applied Methoden 1 2 to gouttelettes most direct dans seed chaque health moitié tests, des can spores, be found qui in sont Table soit 5B ellipsoïdales Part 1 of Chapter avec les extrémités ISTA pointues Rules, der et or peu Table Toleranz: ou G1 un in peu Miles Toleranzen plus (1963). resserrées erlauben septa, eine 5 of the Überprüfung 4,4 6,3 Abschätzung, 1,6 2,1 ob µm die à Variation 8,6 11,8 der 3,0 3,9 Ergebnisse µm, ou eines parfois Testes fusiformes oder results: zwischen et The souvent verschiedenen result courbées of a sans Tests seed resserrement ausreichend health test Reporting should et groß obtuses ist indicate oder à chaque nicht, the extrémité, um scientific an der 7,5 10,5 Genauigkeit name of the 2,0 2,7 der pathogen Ergebnisse zu and zweifeln. the test Eine method Toleranztabelle, used. When reported die für die on µm. detected an meisten ISTA direkten Certificate, Saatgut-Gesundheitsprüfungen results are entered under Other angewendet werden kann, findet sich in Tabelle 5B Teil Determinations. 1 Méthodes générales The des Kapitels report must 5 der indicate ISTA-Vorschriften, the number of oder seeds in tested. Tabelle In G1 the in Miles case of (1963). a negative result (pathogen not detected), Vérification the results des must tolérances be reported : Les as not tolérances detected. fournissent Berichterstattung In des the moyens case of d évaluer a positive der Ergebnisse: result, la variation the Der report du Ergebnisbericht résultat must indicate dans ou the entre einer percentage les Gesundheitsprüfung essais of est infected suffisante seeds. von pour Saatgut s assurer sollte de den l exactitudsenschaftlichen des résultats. Name Des des tolérances Krankheitserregers appropriées, und qui die wis- peuvent verwendete être Methode appliquées enthalten. à la plupart Bei des Berichterstattung essais d analyse Quality sanitaire auf einem directs, assurance ISTA-Bericht peuvent sind être die trouvées Ergebnisse dans unter le Tableau Weitere Partie Untersuchungsergebnisse 1 du Chapitre 5 des Règles einzutragen. ISTA, ou dans la 5B Specific Tableau Der Prüfbericht G1 training du Miles muss (1963). die Anzahl untersuchter Samen angeben. This Indication Im test Falle should des eines résultats only negativen be performed : Le Ergebnisses résultat by d un persons (Krankheitserreger trained sanitaire nicht in nachgewiesen), fungal des semences identification müssen devrait or die under indiquer Ergebnisse their le direct nom als essai who de have qualité been supervision. scientifique nicht nachgewiesen du pathogène berichtet détecté werden. et la méthode d essai employée. Im Falle eines Les positiven résultats sont Ergebnisses écrits dans sollte «Autres der Prüfbericht den Prozentsatz» dans le Bulletin infizierter ISTA. Samen angeben. déterminations Critical Le rapport control doit indiquer points le nombre (CCP) de semences testées. Dans le cas d un résultat négatif (pathogène non détecté), should les résultats be taken doivent not être to mistake rapportés the comme acervuli «non of Care Qualitätssicherung Colletotrichum détecté». dematium (Pers. ex Fr.) Grove var. truncata Spezifische Dans le (Schw.) cas d un Ausbildung Arx résultat or the positif, perithecia le rapport of doit Glomerella indiquer glycines le pourcentage (Hori) Lehman de semences & Wolf, infectées. for the perithecia of D. phaseolorum Diese Untersuchung or the pycnidia sollte nur of durch P. phaseoli. Personen These ausgeführt fruiting bodies werden, are die also entsprechende dark but they Erfahrungen are usually bei not der in Identifikation Assurance von floccose pilzlichen mycelium qualité Erregern as haben is the case bzw. with unter those der direk- of D. a dense, white, phaseolorum ten Anleitung and einer P. Person phaseoli. stehen, In die addition, die entsprechenden there are no dark Kenntnisse Formation setae (sterile besitzt. spécifique hairs) associated with the fruiting bodies of Phomopsis spp. (Step 5). Ce test ne devrait être effectué que par des personnes formées à d identification Kontrollpunkte fongique ou (KKP) sous la supervision de Kritische Media personnes qui and l ont solutions été. Es ist darauf zu achten, dass keine Verwechselungen für die Acidified Perithezien von potato D. phaseolorum dextrose oder agar die Pyknidien (APDA) von P. Points phaseoli critiques mit den Acervuli de contrôle von Colletotrichum (CCP) dematium (McGee, (Pers. ex. 1986, Fr.) Grove 1991) var. truncata (Schw.) Arx oder den Perithezien Attention von à ne pas Glomerella confondre glycines les acervules (Hori) de Lehman Colletotrichum & Wolf vorliegen. Potato dematium dextrose (Pers. Diese ex agar Fruchtkörper Fr.) (BD Grove Difco ): sind var. auch truncata 39 dunkel, g (Schw.) aber Arx sie befinden Distilled/deionised ou les périthèces sich normalerweise de Glomerella water: 1000 nicht glycines ml einem (Hori) dichten, Lehman weißen, Lactic Wolf, flockigen avec acid: les variable Myzel périthèces wie im de Falle D. phaseolorum von D. phaseolorum ou les pyc- und & P. nides phaseoli. de P. Außerdem phaseoli. Ces befinden organes sich de an den fructification Fruchtkörpern sont von également Phomopsis noirs spp. mais keine ils ne dunklen se forment Setae généralement (sterile Haare) pas (Siehe Preparation dans un Punkt mycélium 5). dense, blanc, floconneux comme pour D. phaseolorum et P. phaseoli. Par ailleurs, il n y a pas de 1. septae Weigh noirs out (soies) all ingredients associés aux into organes a suitable de container. fructification 2. Medien de Phomopsis Add 1000 und ml spp. (or (étape Lösungen 500 ml) 5). of distilled/deionised water. 3. Steam to dissolve. 4. Saurer Autoclave Kartoffel-Dextrose-Agar at 121 C, 15 p.s.i. for 15 min. (APDA) 5. Cool to approx. 50 C. 6. (McGee, Adjust 1986, ph to 1991) 4.5 with 85 % lactic acid. It is usually assumed that the lactic acid is sterile, filter sterilise if Kartoffel-Dextrose-Agar contamination is suspected. (BD Difco ): 39 oder 19.5 g 7. Destilliertes/deionisiertes Pour plates (22 ml per Wasser: 90 mm Petri 1000 dish) oder 500 and ml allow Milchsäure: to solidify variabel at room temperature (ca. 22 C) for 24 h before use. 7-016-4 A partir Effectives Gültig del ab 1 1. de er January janvier enero 2017 2018