Nghiên cứu khả năng hấp thu một số kim loại nặng (Cu 2+, Pb 2+, Zn 2+ ) trong nước của nấm men Saccharomyces cerevisiae

Similar documents
PHÂN TÍCH DIỄN BIẾN LƯU LƯỢNG VÀ MỰC NƯỚC SÔNG HỒNG MÙA KIỆT

PREMIER VILLAGE PHU QUOC RESORT

CHƯƠNG I. TỔNG QUAN VỀ HỆ THỐNG DCS- CENTUM CS 3000

Ths. Nguyễn Tăng Thanh Bình, Tomohide Takeyama, Masaki Kitazume

TÀI LIỆU Hướng dẫn cài đặt thư viện ký số - ACBSignPlugin

5/13/2011. Bài 3: Báo cáo kết quả kinh doanh. Nội dung. Trình bày báo cáo kết quả kinh doanh

CÀI ĐẶT MẠNG CHO MÁY IN LBP 3500 và LBP 5000

Chúng ta cùng xem xét bài toán quen thuộc sau. Chứng minh. Cách 1. F H N C

KIỂM TOÁN CHU TRÌNH BÁN HÀNG VÀ NỢ PHẢI THU

NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM BIẾN ĐỘNG DÒNG CHẢY VÙNG VEN BIỂN HẢI PHÒNG

Hiện nó đang được tân trang toàn bộ tại Hải quân công xưởng số 35 tại thành phố Murmansk-Nga và dự trù trở lại biển cả vào năm 2021.

CMIS 2.0 Help Hướng dẫn cài đặt hệ thống Máy chủ ứng dụng. Version 1.0

Bài 15: Bàn Thảo Chuyến Du Ngoạn - cách gợi ý; dùng từ on và happening

BIÊN DỊCH VÀ CÀI ĐẶT NACHOS

Bottle Feeding Your Baby

XÂY DỰNG MÔ HÌNH CƠ SỞ DỮ LIỆU PHÂN TÁN CHO HỆ THỐNG THÔNG TIN ĐẤT ĐAI CẤP TỈNH VÀ GIẢI PHÁP ĐỒNG BỘ HÓA CƠ SỞ DỮ LIỆU TRÊN ORACLE

Model SMB Lưỡi dao, bộ phận cảm biến nhiệt và lòng bình bằng thép không gỉ 304 an toàn cho sức khỏe.

NATIVE ADS. Apply from 01/03/2017 to 31/12/2017

MỐI QUAN HỆ GIỮA ĐỘ THOÁNG KHÍ CỦA BAO BÌ BẢO QUẢN CHẤT LƯỢNG CỦA NHÃN XUỒNG CƠM VÀNG TRONG QUÁ TRÌNH TỒN TRỮ

Các bước trong phân khúc thi truờng. Chương 3Phân khúc thị trường. TS Nguyễn Minh Đức. Market Positioning. Market Targeting. Market Segmentation

khu vực ven biển Quảng Bình - Quảng Nam

nhau. P Z 1 /(O) P Z P X /(Y T ) khi và chỉ khi Z 1 A Z 1 B XA XB /(Y T ) = P Z/(O) sin Z 1 Y 1A PX 1 P X P X /(Y T ) = P Z /(Y T ).

CHẤT LƯỢNG MÔI TRƯỜNG NƯỚC BIỂN VEN BỜ ĐẢO PHÚ QUỐC

Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ Số chuyên đề: Thủy sản (2014)(1):

Tng , , ,99

SỬ DỤNG ENZYME -AMYLASE TRONG THỦY PHÂN TINH BỘT TỪ GẠO HUYẾT RỒNG

PHÂN PHỐI CHUẨN. TS Nguyen Ngoc Rang; Website: bvag.com.vn; trang:1

CHƯƠNG 4 BẢO VỆ QUÁ TRÌNH LÊNMEN

Định hình khối. Rèn kim loại

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM QCVN 4-1: 2010/BYT QUY CHUẨN KỸ THUẬT QUỐC GIA VỀ PHỤ GIA THỰC PHẨM - CHẤT ĐIỀU VỊ

ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ XỬ LÝ NƯỚC THẢI CHĂN NUÔI LỢN BẰNG HẦM BIOGAS QUY MÔ HỘ GIA ĐÌNH Ở THỪA THIÊN HUẾ

MỞ ĐẦU... 1 CHƯƠNG I. TỔNG QUAN MỘT SỐ KHÁI NIỆM CƠ BẢN...

ĐIỀU KHIỂN ROBOT DÒ ĐƯỜNG SỬ DỤNG BỘ ĐIỀU KHIỂN PID KẾT HỢP PHƯƠNG PHÁP PWM

Tiến tới hoàn thiện và triển khai hệ thống mô hình giám sát, dự báo và cảnh báo biển Việt Nam

Nguyễn Thọ Sáo* Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, ĐHQGHN, 334 Nguyễn Trãi, Hà Nội, Việt Nam. Nhận ngày 15 tháng 7 năm 2012

Trịnh Minh Ngọc*, Nguyễn Thị Ngoan

ĐÁNH GIÁ ẢNH HƯỞNG CỦA CHIỀU RỘNG TẤM ĐẾN BIẾN DẠNG GÓC KHI HÀN TẤM TÔN BAO VỎ TÀU THỦY

NHỊP ĐẬP THỊ TRƯỜNG QUÝ 3, 2015

XÂY DỰNG GIẢN ĐỒ SỞ THÍCH SỬ DỤNG PHƯƠNG PHÁP FLASH PROFILE TRONG ĐÁNH GIÁ CHẤT LƯỢNG YAOURT TRÁI CÂY NHIỆT ĐỚI

BÀI TẬP DỰ ÁN ĐÂU TƯ (Học kỳ 3. Năm )

Tạp chí phân tích Hóa, Lý và Sinh học - Tập 20, số 3/2015

Chương 3: Chiến lược tìm kiếm có thông tin heuristic. Giảng viên: Nguyễn Văn Hòa Khoa CNTT - ĐH An Giang

NGHIÊN CỨU ỨNG DỤNG ENZYME PROTEASE TỪ VI KHUẨN (Bacillus subtilis) ĐỂ THỦY PHÂN PHỤ PHẨM CÁ TRA

khu vực Vịnh Nha Trang

AT INTERCONTINENTAL HANOI WESTLAKE 1

Abstract. Recently, the statistical framework based on Hidden Markov Models (HMMs) plays an important role in the speech synthesis method.

QUY CÁCH LUẬN VĂN THẠC SĨ

TCVN 3890:2009 PHƯƠNG TIỆN PHÒNG CHÁY VÀ CHỮA CHÁY CHO NHÀ VÀ CÔNG TRÌNH TRANG BỊ, BỐ TRÍ, KIỂM TRA, BẢO DƯỠNG

The W Gourmet mooncake gift sets are presently available at:

BẢN TIN THÁNG 05 NĂM 2017.

NGHIÊN CỨU KỸ THUẬT TƯỚI NƯỚC TIẾT KIỆM VÀ DẠNG PHÂN BÓN SỬ DỤNG QUA NƯỚC TƯỚI CHO CÀ PHÊ VÙNG TÂY NGUYÊN

Ô NHIỄM ĐẤT, NƯỚC VÀ CÁC PHƯƠNG PHÁP XỬ LÝ

TRIỂN VỌNG CỦA NGÀNH MÍA ĐƯỜNG, NHIÊN LIỆU SINH HỌC VÀ CÁC VẤN ĐỀ VỀ KỸ THUẬT TRỒNG MÍA

ẢNH HƯỞNG CỦA THỨC ĂN ĐẾN SINH TRƯỞNG VÀ TỈ LỆ SỐNG CỦA ẤU TRÙNG TRAI TAI TƯỢNG VẢY (Tridacna squamosa Lamack, 1819)

Bạn có thể tham khảo nguồn tài liệu được dịch từ tiếng Anh tại đây: Thông tin liên hệ:

Những Điểm Chính. Federal Poverty Guidelines (Hướng dẫn Chuẩn Nghèo Liên bang) như được

CHỌN TẠO GIỐNG HOA LAN HUỆ (Hippeastrum sp.) CÁNH KÉP THÍCH NGHI TRONG ĐIỀU KIỆN MIỀN BẮC VIỆT NAM

Phương thức trong một lớp

So sánh các phương pháp phân tích ổn định nền đường đắp

CƠ SỞ DỮ LIỆU PHÂN TÁN

PHÁT TRIỂN ỨNG DỤNG WEB

CÁC PHƯƠNG PHÁP PHÂN TÍCH THỐNG KÊ ĐA BIẾN SỐ LIỆU NGHIÊN CỨU LÂM NGHIỆP BẰNG SAS

CHƯƠNG IX CÁC LỆNH VẼ VÀ TẠO HÌNH (TIẾP)

NGHIÊN CỨU CÔNG NGHỆ TRÍCH LY TINH DẦU TỪ LÁ TÍA TÔ

Giáo dục trí tuệ mà không giáo dục con tim thì kể như là không có giáo dục.

KHẢ NĂNG TỰ LÀM SẠCH SINH HỌC VÀ LÝ HỌC CỦA NƯỚC ĐẦM THỦY TRIỀU, KHÁNH HÒA

Cơ sở khoa học cho chọn giống Pơ Mu theo mục tiêu nâng cao

BỘ THÔNG TIN VÀ TRUYỀN THÔNG TRUNG TÂM INTERNET VIỆT NAM TÀI LIỆU HƯỚNG DẪN TRIỂN KHAI DNSSEC TẠI CÁC NHÀ ĐĂNG KÝ TÊN MIỀN

CÁC BIỆN PHÁP BẢO VỆ THEO THỦ TỤC Quyền Giáo Dục Đặc Biệt của Gia Đình Quý vị

THỬ NGHIỆM NUÔI CHAETOCEROS SP. VỚI MỘT SỐ MÔI TRƯỜNG ĐƠN GIẢN TRONG PHÒNG THÍ NGHIỆM CULTURING OF CHAETOCEROS SP. IN SOME SIMPLE MEDIUMS IN LAB

BẢN TIN THÁNG 09 NĂM 2015

NHÂN NUÔI CÂY HOA HỒNG CỔ SAPA (ROSA GALLICA L.) BẰNG KỸ THUẬT CẤY MÔ IN VITRO

ĐÁNH GIÁ DIỄN BIẾN MÔI TRƯỜNG VÀ CÔNG TÁC BẢO VỆ MÔI TRƯỜNG TẠI CÁC MỎ DẦU KHÍ THUỘC BỂ CỬU LONG

NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT SỎI NHẸ KERAMZIT TỪ ĐẤT SÉT LÀM GIÁ THỂ TRỒNG RAU MÀU, CÂY KIỂNG Ở ĐỒNG BẰNG SÔNG CỬU LONG

DANH SÁCH THÍ SINH DỰ THI IC3 IC3 REGISTRATION FORM

KẾT QUẢ CHỌN TẠO GIỐNG NGÔ NẾP LAI PHỤC VỤ CHO SẢN XUẤT Ở CÁC TỈNH PHÍA NAM

SB 946 (quy định bảo hiểm y tế tư nhân phải cung cấp một số dịch vụ cho những người mắc bệnh tự kỷ) có ý nghĩa gì đối với tôi?

Điểm Quan Trọng về Phúc Lợi

PHÂN TÍCH TÍNH CHẤT SẢN PHẨM KHÍ, CONDENSATE MỎ THÁI BÌNH NHẰM BỔ SUNG CHO HỆ THỐNG CƠ SỞ DỮ LIỆU DẦU KHÍ VIỆT NAM

KHẢO SÁT TỈ LỆ VIÊM TẠI CHỔ DO ĐẶT CATHETER TĨNH MẠCH NGOẠI BIÊN TẠI KHOA HỒI SỨC CẤP CỨU BVTM ANGIANG 4-10/2011

Savor Mid-Autumn Treasures at Hilton Hanoi Opera! Gìn giữ nét đẹp cổ truyền

sự phát triển của ngành công nghiệp hỗ trợ ô tô Việt Nam

Bộ Kế hoạch & Đầu tư Sở Kế hoạch & Đầu tư Điện Biên

NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG ĐA DẠNG HÓA SẢN PHẨM ĐỂ NÂNG CAO HIỆU QUẢ CỦA NHÀ MÁY ĐẠM CÀ MAU

Hướng dẫn cài Windows 7 từ ổ cứng HDD bằng ổ đĩa ảo qua file ISO bằng hình ảnh minh họa

Xác định phân bố không gian của các hằng số điều hòa thủy triều tại vùng biển vịnh Bắc Bộ

Kiểm tra Khả năng Nhiễm khuẩn trong Sơn móng (2008)

2.1.3 Bảng mã ASCII Bộ vi xử lý (Central Processing Unit, CPU) Thanh ghi... 16

TIÊU CHUẨN QUỐC GIA TCVN : 2013 IEC : 2009

ẢNH HƯỞNG CỦA MƯA ĐẦU MÙA TỚI ĐỘ DÀY QUANG HỌC SOL KHÍ TẠI BẠC LIÊU

Tóm tắt. Đỗ Duy Khoản 1, Ngô Hữu Hải 2, Vũ Minh Đức 1 Vũ Hồng Cường 1, Lưu Thanh Hảo 1 1. Công ty Liên doanh Điều hành chung Groupement Bir Seba 2

HỘI NGHỊ KHOA HỌC TOÀN QUỐC VỀ SINH THÁI VÀ TÀI NGUYÊN SINH VẬT LẦN THỨ 5

NGHIÊN CỨU HẤP PHỤ THUỐC NHUỘM HOẠT TÍNH TRONG NƯỚC THẢI NGÀNH DỆT NHUỘM BẰNG CHITOSAN KHÂU MẠCH BỨC XẠ CÓ NGUỒN GỐC TỪ VỎ TÔM

CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM Độc lập - Tự do - Hạnh phúc Số: 02/2014/TT-BTTTT Hà Nội, ngày 10 tháng 3 năm 2014 THÔNG TƯ

Chương 17. Các mô hình hồi quy dữ liệu bảng

GIỚI THIỆU. Nguồn: Nguồn:

Thông Tin Dành Cho Gia Đình và Bệnh Nhân. Mụn Trứng Cá. Nguyên nhân gây ra mụn trứng cá là gì? Các loại khác nhau của mụn trứng cá là gì?

Nghiên cứu này nhằm phân tích mối quan hệ giữa nguồn

Công ty Cổ phần Tập đoàn Ma San Thông tin về Công ty

Thiết bị quang~ Bởi: Khoa CNTT ĐHSP KT Hưng Yên

Transcription:

Tạp chí Khoa học Đại học Quốc gia Hà Nội, Khoa học Tự nhiên và Công nghệ 23 (2007) 99-106 Nghiên cứu khả năng hấp thu một số kim loại nặng (Cu 2+, Pb 2+, Zn 2+ ) trong nước của nấm men Saccharomyces cerevisiae Nguyễn Thị Hà*, Trần Thị Hồng, Nguyễn Thị Thanh Nhàn Đỗ Thị Cẩm Vân, Lê Thị Thu Yến Khoa Môi trường, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội 334 Nguyễn Trãi, Hà Nội, Việt Nam Nhận ngày 20 tháng 6 năm 2006 Tóm tắt. Các phương pháp tách kim loại nặng trong nước đang được áp dụng thường phải sử dụng hoá chất và có chi phí khá cao. Do vậy việc nghiên cứu các biện pháp hiệu quả hơn như phương pháp hấp thu sinh học để tách kim loại nặng là rất cần thiết. Trong nghiên cứu này đã khảo sát khả năng hấp thu sinh học một số kim loại nặng (Cu 2+, Pb 2+ và Zn 2+ ) của Saccharomyces cerevisiae. Một số yếu tố ảnh hưởng đến khả năng hấp thu như ph, nồng độ ban đầu của kim loại nặng cũng được khảo sát. Kết quả cho thấy S. cerevisiae sinh trưởng tốt trong môi trường ph = 5, kết quả này cũng phù hợp với các nghiên cứu trước đây. Khả năng hấp thu ion Cu 2+, Pb 2+ và Zn 2+ chủ yếu xảy ra ở 6 giờ đầu khi bắt đầu quá trình hấp thu. Khả năng hấp thu tăng khi nồng độ ban đầu của kim loại tăng. Khả năng hấp thu cực đại của Cu 2+ đạt 63% sau 48 giờ. Nồng độ Cu 2+ còn lại trong dung dịch giảm từ 250 đến 92,7mg/l; và trong sinh khối là 89mg/g. Khả năng hấp thu kim loại nặng của S. cerevisiae theo thứ tự: Pb 2+ > Cu 2+ > Zn 2+, với nồng độ đầu vào 50mg/l, sau 48 giờ nồng độ của Pb 2+, Cu 2+ và Zn 2+ trong dịch giảm xuống tương ứng còn 2,8; 37,5 và 39,5mg/l. Hiệu suất hấp thu đạt tương ứng 95; 25 và 21%. Kết quả cho thấy S. cerevisiae có khả năng hấp thu kim loại nặng khá tốt, tuy nhiên cần phải tiến hành các nghiên cứu tiếp theo về cơ chế quá trình hấp thu; khả năng hấp thu các kim loại khác như Cr, Mn, Ni, Cd, Hg...; và khả năng hấp thu kim loại nặng trong nước thải thực tế. 1. Mở đầu Ô nhiễm môi trường nước bởi kim loại nặng (KLN) do hoạt động khai thác mỏ, công nghiệp mạ, luyện kim, giao thông vận tải, hoạt động sản xuất và tái chế kim loại nặng tại các làng nghề ở nước ta đang là vấn đề rất bức xúc. Xử lý nước bị ô nhiễm KLN bằng công nghệ sinh học giải pháp phù hợp để làm sạch môi trường đã được nhiều nước trên thế Tác giả liên hệ. ĐT: 84-4-8584995 E-mail: hant_mt2@vnu.edu.vn 99 giới áp dụng. Công nghệ này tương đối phù hợp với các nước đang phát triển như Việt Nam vì đơn giản, giá thành thấp và không đòi hỏi trang thiết bị và quy trình phức tạp như các công nghệ khác. Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) là một chủng nấm men có khả năng sinh trưởng và phát triển rất tốt, không có hại khi phát tán vào môi trường. Chủng nấm men này có thể được phân lập từ bã thải của các nhà máy bia, rượu nên có khả năng ứng dụng vào thực tế [1]. Trong công trình này đã nghiên cứu khả năng hấp thu một số kim loại nặng trong nước của nấm men S. cerevisiae và khảo

100 Nguyễn Thị Hà và nnk. / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự Nhiên và Công nghệ 23 (2007) 99-106 sát các yếu tố ảnh hưởng đến hiệu quả hấp thu kim loại làm cơ sở áp dụng trong xử lý nước ô nhiễm kim loại nặng. 2. Sử dụng nấm men S. cerevisiae trong hấp thu KLN 2.1. Sự hấp thu kim loại của S. cerevisiae [2] Nấm men S. cerevisiae sinh trưởng tốt nhất trong khoảng nhiệt độ 27-33 o C, ph 4,5 5,5. Nấm men chịu được độ cồn, chịu mặn tốt và chịu được ph thấp nên khi nuôi cấy trong môi trường axit mạnh có thể giảm khả năng nhiễm vi khuẩn lạ của chúng S. cerevisiae là tác nhân mang và tích lũy kim loại (Pb, Hg, Cr, Mn, Cu, Zn, Cd...) vào tế bào cơ thể với mức độ khác nhau khi sinh trưởng trong môi trường có mặt các KLN này. Các kim loại Cu, Zn, Mn có ảnh hưởng dương tính lên hoạt động hô hấp và tốc độ phát triển của S. cerevisiae. Tác động độc hại của KLN đến cơ thể sinh vật giảm theo trật tự: Hg 2+ > Cd 2+ > Cu 2+ > Ni 2+ > Zn 2+ > Pb 2+. Sự hấp thu kim loại ở S. cerevisiae diễn ra ở cả tế bào sống và tế bào chết, quá trình hấp thu Cu, Zn, Pb ở tế bào nấm men S. cerevisiae được giải thích như sau: trước tiên, Cu sẽ tham gia vào quá trình tổng hợp metallo thionein, sau đó metallo thionein bao quanh kim loại và bảo vệ S.cerevisiae khỏi độc tính của KLN. Sức đề kháng của S. cerevisiae với ion Cu 2+ liên quan đến sự tạo thành liên kết kim loại-protein (metallo thionein), sự khoáng hóa và sự tích tụ tạm thời tại không bào. Sự tích lũy kẽm trong nấm men do kẽm kích thích sự hình thành liên kết acetaldehyde với alcohol dehydrogenase. Kẽm thúc đẩy sự tổng hợp nhân bào, thiếu kẽm sẽ kìm hãm sự phát triển của tế bào. Theo quan điểm di truyền học, sự tích lũy liên quan đến quá trình trao đổi chất và cấu trúc của ion kim loại. Vì vậy, Cu và Zn có vai trò tham gia vào cấu trúc của Cu, Zn peoxit dismutase, đây là enzim đảm nhiệm vai trò khử độc của tế bào nấm men. Chì là nguyên tố không cần thiết cho vi sinh vật. Chì được tích luỹ ở cả tế bào sống và tế bào chết và đều liên quan đến hiện tượng bề mặt mà không có hoặc rất ít liên quan đến hiện tượng hấp thu nội bào (trao đổi chất) trừ khi khuếch tán. 2.2. Các yếu tố ảnh hưởng đến sự hấp thu KLN của S. cerevisiae Các yếu tố ảnh hưởng tới quá trình hấp thu sinh học nói chung và sự hấp thu KLN của S. cerevisiae nói riêng gồm [2]: - Nhiệt độ: Trong khoảng nhiệt độ 20 35 o C hầu như không ảnh hưởng tới hiệu quả hấp thu; - ph: ph được coi là yếu tố quan trọng nhất trong quá trình hấp thu. Giá trị ph ảnh hưởng tới tính chất hoá học của kim loại trong dung dịch, hoạt động của các nhóm chức trong sinh khối và sự cạnh tranh của các ion kim loại; - Hàm lượng sinh khối trong dung dịch: sự hấp thu sinh học tăng tỉ lệ thuận với lượng sinh khối vi sinh trong môi trường; - Sự có mặt của các ion kim loại khác: Sự loại bỏ một ion kim loại có thể chịu tác động bởi sự có mặt của các ion kim loại khác, ví dụ, sự hấp thu Ur bởi sinh khối vi khuẩn, nấm mốc và nấm men bị ảnh hưởng bởi sự có mặt của Mg, Co, Cu, Cd, Hg và Pb trong dung dịch; - Sự tiếp xúc của tế bào nấm men và ion kim loại: khả năng hấp thu tăng lên khi tăng tần số tiếp xúc giữa sinh khối tế bào vi sinh vật và ion KLN. 3. Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu được thực hiện tại Phòng thí nghiệm Khoa Môi trường- Đại học khoa học

Nguyễn Thị Hà và nnk. / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự Nhiên và Công nghệ 23 (2007) 99-106 101 Tự nhiên Hà Nội và Viện Công nghệ Sinh học-viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam. Hàm lượng kim loại nặng được xác định bằng phương pháp trắc quang và phổ hấp thụ nguyên tử (máy AAS-6800- Shimadzu, Nhật). Xác định số nấm men bằng phương pháp đếm đĩa chuẩn (cấy trong đĩa betri, môi trường thạch Hasen). Các thí nghiệm được lặp lại 2-3 lần, lấy giá trị trung bình. Mẫu nước nghiên cứu: Các mẫu nước thải tự tạo có mặt KLN với các nồng độ tương ứng: Cu 2+ (50, 100, 150, 250, 300mg/l); Pb 2+ (50 mg/l); Zn 2+ (50mg/l) được pha chế sử dụng các muối CuSO 4.5H 2 O; Pb(NO 3 ) 2 và ZnSO 4.7H 2 O và nước cất hai lần trong các bình tam giác vô trùng. Vi sinh vật nghiên cứu: Chủng S. cerevisiae do Viện Công nghệ Sinh học Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam cung cấp, được bảo quản ở nhiệt độ 4 o C. Môi trường Hansen nuôi cấy vi sinh được pha bằng nước cất 2 lần trong các bình tam giác vô trùng, điều chỉnh ph về 4,5-5 bằng dung dịch H2SO4, bổ sung nước thải tự tạo, nút bông và bao kín lại bằng giấy báo, đưa vào nồi hấp khử trùng. Môi trường Hansen dịch thể (g/l): Glucosa: 50g; Pepton: 5g; MgSO 4.7H 2 O: 3g; KH 2 PO 4 : 3g; K 2 HPO 4 : 3g; Cao nấm men: 1g. Khi cấy trên đĩa thạch, môi trường được bổ sung 20g thạch/l. 3.1. Phương pháp nuôi cấy vi sinh trong môi trường dịch thể Chủng nấm men được hoạt hoá trong tủ ấm ở 28 o C trong 2 giờ trước khi cấy. Nuôi cấy cấp 1: Chủng nấm men đã hoạt hoá được cấy vào 50ml môi trường dinh dưỡng trong bình tam giác 250ml, tiến hành ở điều kiện vô trùng (tủ hút với đèn cực tím); nút bông và bao kín lại bằng giấy báo, lắc (300 vòng/phút) ở nhiệt độ phòng trong 48 giờ. Nuôi cấy cấp 2: Chuyển 50ml sinh khối cấp 1 vào bình tam giác vô trùng có chứa 500ml môi trường dinh dưỡng (tỉ lệ 1:10), tiến hành tương tự qúa trình nuôi cấy cấp 1, thu được dịch sinh khối cấp 2. 3.2. Phương pháp khảo sát ảnh hưởng của ph đến quá trình sinh trưởng của S. cerevissiae Cho 100ml nước thải tự tạo vào các bình tam giác (6 bình); cho vào 6 bình khác 100ml nước cất 2 lần làm đối chứng; điều chỉnh ph của các dung dịch đến giá trị: 3,5; 4; 4,5; 5; 5,5; 6 (sử dụng dung dịch H 2 SO 4 0,5M và NaOH loãng). Bổ sung 50ml sinh khối cấp 2 vào mỗi bình tam giác (tương đương 0,26g sinh khối khô). Khi đó, thể tích môi trường là 150ml, nồng độ Cu 2+ 50mg/l, lắc ở nhiệt độ phòng trong 6 giờ (150 vòng/phút). Lấy từ mỗi bình tam giác 10ml dịch, ly tâm (4000rpm, 20 phút); tách phần dịch trong ở trên; phần sinh khối VSV lắng ở đáy được sấy ở 105 o C đến khối lượng không đổi trong 48 giờ. 3.3. Nghiên cứu khả năng hấp thu KLN của nấm men Chuẩn bị 4 bình chứa 50ml sinh khối cấp 2 và 100ml dung dịch Cu 2+ có nồng độ Cu 2+ tương ứng là: 50, 150, 250, 300mg/l. Điều chỉnh ph về 5; lắc (150 vòng/phút). Lấy 2ml mẫu từ các bình sau các khoảng thời gian: 1; 3; 6; 12; 24 và 48 giờ, ly tâm (4000rpm, 20 phút). Phần dịch trong được tách riêng ra để xác định hàm lượng KLN còn lại. Phần sinh khối lắng ở đáy được sấy đến khối lượng không đổi (105 o C, 48 giờ). Tiến hành tương tự với dung dịch chứa Zn 2+ và Pb 2+ 50mg/l. 3.4. Phương pháp thu hồi KLN trong sinh khối sau hấp thu Phần sinh khối lắng ở đáy ống ly tâm được rửa 2-3 lần bằng nước cất, chuyển vào

102 Nguyễn Thị Hà và nnk. / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự Nhiên và Công nghệ 23 (2007) 99-106 chén sứ, cô cạn và nung ở 500 o C trong 24 giờ; phần tro trắng trong chén nung (oxit kim loại) được hoà tan bằng 5ml dung dịch axit HCl 20%, định mức đến 50ml bằng nước cất hai lần và xác định hàm lượng Cu 2+. Tiến hành tương tự với mẫu đối chứng: lấy 5ml HCl 20% cho vào bình định mức 50ml, định mức bằng nước cất 2 lần và phân tích nồng độ ion Cu 2+ trong mẫu. 4. Kết quả và thảo luận 4.1. Kết quả khảo sát khả năng sinh trưởng của S.cerevisiae phụ thuộc vào ph môi trường Ảnh hưởng của ph môi trường (dung dịch không có và có mặt ion Cu 2+ 50mg/l) đến quá trình sinh trưởng S. cerevisiae (sau 6 giờ) được chỉ ra ở đồ thị 1. Đồ thị cho thấy sự ức chế sinh trưởng của S. cerevisiae của ion Cu 2+, sinh trưởng của tế bào nấm men trong môi trường không có ion Cu 2+ lớn hơn trong môi trường có mặt ion Cu 2+ (nồng độ 50 mg/l). Trong cả hai trường hợp, sinh khối tế bào sau 6 giờ đạt giá trị lớn nhất ở môi trường ph = 5; khối lượng sinh khối đạt 2,71g/l trong môi trường có Cu 2+ 50mg/l. Kết quả này cho thấy ph có ảnh hưởng đáng kể tới sự phát triển của tế bào nấm men. Ảnh hưởng này có thể giải thích do sự tạo thành ATPase-H +, liên quan đến sự hấp thu cation của tế bào thông qua thiết lập liên kết plasma màng tế bào. Kết quả này cũng phù hợp với các nghiên cứu trước đây [3-5]. Từ kết quả này, các thí nghiệm tiếp theo được tiến hành trong môi trường ph =5, giá trị ph tối ưu cho sinh trưởng của S. cerevisiae. 4 Sinh khối tế bào (g/l) 3 2 1 Môi trường chứa ion Cu 2+ (50mg/l) Môi trường không chứa ion Cu 2+ 0 3,5 4 4,5 5 5,5 6 ph Đồ thị 1. Khả năng sinh trưởng của S. cerevisiae phụ thuộc vào ph môi trường. 4.2. Kết quả khảo sát khả năng hấp thu Cu 2+ của S. cerevisiae Khả năng hấp thu Cu 2+ khi bổ sung 50ml sinh khối cấp 2 vào mỗi bình chứa 100ml dung dịch Cu 2+ nồng độ tương ứng 50; 100; 250mg/l; thời gian hấp thu 48 giờ. Kết quả ở Đồ thị 2 cho thấy khi thời gian hấp thu tăng thì nồng độ Cu 2+ trong dung dịch giảm dần, đặc biệt rõ rệt trong khoảng 6 giờ đầu. Hiệu suất hấp thu Cu 2+ của S. cerevisiae tỉ lệ thuận với nồng độ ion Cu 2+ ban đầu, tương ứng đạt 25; 40; và 60% với nồng độ ban đầu là 50; 100; và 250mg/l (sau 48 giờ). Kết quả này có thể do trong thời gian đầu nồng độ ion KLN trong dung dịch và dinh dưỡng cho vi sinh

Nguyễn Thị Hà và nnk. / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự Nhiên và Công nghệ 23 (2007) 99-106 103 vật còn lớn, số lượng nấm men tiếp xúc với ion KLN còn cao nên hiệu suất hấp thu tốt hơn. Kết quả cũng cho thấy ảnh hưởng của nồng độ ion Cu 2+ trong môi trường đến quá trình sinh trưởng của S. cerevisiae, khối lượng sinh khối tế bào tỉ lệ nghịch với nồng độ Cu 2+ trong môi trường (Đồ thị 3). Có thể thấy rõ sự ức chế sinh trưởng đáng kể hơn ở môi trường có nồng độ Cu 2+ 300mg/l so với nồng độ 50mg/l. Nồng độ ion Cu 2+ còn lại trong dung dịch (mg/l) 250 200 150 100 50 50 mg/l 100 mg/l 250 mg/l 0 0 6 12 18 24 30 36 42 48 Thời gian (h) Đồ thị 2. Kết quả khảo sát khả năng hấp thu Cu 2+ của S. cerevisiae. 4.3. Kết quả so sánh khả năng hấp thu ion Cu 2+, Pb 2+, Zn 2+ trong dung dịch của S. cervisiae Khả năng hấp thu sinh học với ion Cu 2+, Pb 2+ và Zn 2+ (nồng độ 50mg/l) cho thấy khả năng hấp thu của nấm men S. cerevisiae là khác nhau đối với mỗi kim loại. Khả năng hấp thu ion Pb 2+ của S. cerevisiae là lớn nhất, nồng độ trong dung dịch sau hấp thu còn 2,8 mg/l (hiệu suất ~ 95%), hiệu suất hấp thu Cu 2+ và Zn 2+ tương ứng là 25 và 21%. Kết quả này là do trong môi trường có mặt Pb 2+ khả năng sinh trưởng của S. cerevisiae tốt hơn nhiều so với trong môi trường có mặt Cu 2+. Điều này cũng thể hiện qua số lượng nấm men trong dịch cấy cấp 2; trong môi trường sau khi hấp thu ion Zn 2+, Cu 2+ ; và Pb 2+ tương ứng là 6,4 10 8 ; 7,6 10 8 và 12,6 10 8 MPN/100ml (Đồ thị 4).

104 Nguyễn Thị Hà và nnk. / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự Nhiên và Công nghệ 23 (2007) 99-106 4 Sinh khối tế bào (g/l) 3 2 1 0 Thời gian (h) 50 mg /l 100 mg/l 250 mg/l 300mg/l 0 6 12 18 24 30 36 42 48 Đồ thị 3. Ảnh hưởng của nồng độ ion Cu 2+ trong môi trường đến quá trình sinh trưởng của S. cerevisiae. 50 40 Nồng độ (mg/l) 30 20 10 Zn 2+ Cu 2+ Pb 2+ 0 0 6 12 18 24 30 36 42 48 Thời gian(h) Đồ thị 4. So sánh khả năng hấp thu ion Cu 2+, Pb 2+, Zn 2+ trong dung dịch của S. cerevisiae. Như vậy khả năng hấp thu của nấm men S. cerevisiae có thể sắp xếp theo trật tự: Pb 2+ > Cu 2+ > Zn 2+. Kết quả này cũng phù hợp với một số nghiên cứu trước đây [6, 7]. Ngoài ra, các nghiên cứu cũng cho thấy độc tính đối với vi sinh vật của Cu 2+ lớn hơn so với Pb 2+. 5. Kết luận Saccharomyces cerevisiae có khả năng sinh trưởng tốt trong môi trường ph = 5, điều này cũng phù hợp với các nghiên cứu trước đây. Saccharomyces cerevisiae trong môi trường có mặt Cu 2+, Pb 2+ và Zn 2+ không những vẫn sinh trưởng tốt mà còn có khả năng hấp thu hiệu quả các kim loại này. Quá trình hấp thu chủ yếu trong 6 giờ đầu tiên. Khi thay đổi nồng độ Cu 2+ ban đầu từ 50 đến 250mg/l, hiệu suất hấp thu tỉ lệ thuận với nồng độ. Với nồng độ Cu 2+ ban đầu 250mg/l khả năng hấp thu cao nhất, sau 48 giờ nồng độ Cu 2+ còn lại trong dung dịch là

Nguyễn Thị Hà và nnk. / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự Nhiên và Công nghệ 23 (2007) 99-106 105 92,7mg/l, trong sinh khối khô là 89mg/g sinh khối tế bào khô, hiệu suất hấp thu đạt 63%. Khả năng hấp thu của S. cerevisiae có trình tự: Pb 2+ > Cu 2+ > Zn 2+ với cùng nồng độ ban đầu là 50mg/l, sau 48 giờ hấp thu nồng độ Pb 2+, Cu 2+ và Zn 2+ trong dung dịch tương ứng giảm xuống còn 2,8; 37,5 và 39,5 mg/l; hiệu suất hấp thu đạt khoảng 95; 25 và 21%. Để làm cơ sở để cho ứng dụng xử lý kim loại nặng trong nước thải, các nghiên cứu tiếp theo cần xem xét đầy đủ hơn các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình, cơ chế hấp thu KLN của S. cerevissiae; khả năng hấp thu của S. cerevisiae đối với những kim loại khác như Cr, Mn, Ni, Cd, Hg... và sự hấp thu kim loại nặng trong mẫu nước thải thực tế. Tài liệu tham khảo [1] Đặng Đình Kim, Xử lý ô nhiễm một số kim loại nặng trong nước thải công nghiệp bằng phương pháp sinh học, Trung tâm thông tin - tư liệu, Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam, 2003. [2] Vlatka. Gulan. Zetic, Vesna Stehlick Tomas, Slobodan Graba, Lavoslav Darnir Kozlek. Chromium uptake by Saccharomyces cerevisiae and isolation of glucose tolerance factor from yeast biomass, Đại học Zagreb, Croatia, 2001 (http://www.ias ac.in/jbiosci/june2001/217.pdf) [3] Alicia Blanco, Begoura Sanz, Marowsa J. Llama and Juan L. Serra, Biosorption of heavy metals to immobilised Phormidium laminosum biomass, Journal of Biotechnology 69 (1999) 227. [4] K.J. Tiemann, G. Gamez, K. Dokken, J.G. Parsons, J.L. Gardea-Torresdey, Chemical modification and X-ray absorption studies for lead(ii) binding by Medicago sativa (alfalfa) biomass, Microchemical Journal 71(2002) 287. [5] Semra Ilhan, Macit Nurbas Nourbakhsh, Serpil Kilicarslan, Husey, Removal of chromium, lead and copper ions from industrial waste waters by Staphylococus saprophyticus, Đại học Osmangazi Thổ Nhĩ Kỳ, 2001. [6] B.S. Mohan, B.B. Hosetti., Potential phytotoxicity of lead and cadmium to lemna minor grown in sewage stabilization ponds, Environmental Pollution 98 (1997) 233. [7] F. Bux, B. Atkinson, H.C. Kasan, Zinc biosorption by waste activated and digested sludges, Water Science and Technology 39 (1999) 127. Preliminary study on removal of some heavy metals (Cu 2+, Pb 2+, Zn 2+ ) in water by biosorption using Saccharomyces cerevisiae yeast Nguyen Thi Ha, Tran Thi Hong, Nguyen Thi Thanh Nhan Do Thi Cam Van, Le Thi Thu Yen Department of Environmental Science, College of Science, VNU 334 Nguyen Trai, Hanoi, Vietnam Traditional methods currently employed to remediate heavy metal contaminated waters prove to be cost prohibitive. Therefore, more cost-effective methods of remediating heavy metals from contaminated waters need to be developed. The use of bio-adsorbents may be a possible solution. In this study, the heavy metal (Cu 2+, Pb 2+ and Zn 2+ ) absorption capacity of Saccharomyces cerevisiae is investigated. The effect of ph of media and the concentration of heavy metal ion are also studied.

106 Nguyễn Thị Hà và nnk. / Tạp chí Khoa học ĐHQGHN, Khoa học Tự Nhiên và Công nghệ 23 (2007) 99-106 The results show that S. cerevisiae is well developed in the media having ph 5, This is in agreement with the previous studies. The absorption of Cu 2+, Pb 2+ và Zn 2+ ions mainly occurs during first 6 hours with the absorption efficiency increased together with increasing of initial concentration of heavy metals. The maximum absorption efficiency for Cu 2+ reaches 63% after 48 hours (Cu 2+ concentration in substrate reduces from 250 to 92.7mg/l; and is 89mg/g dry biomass. The heavy metal absorption capacity of S. cerevisiae is in order: Pb 2+ > Cu 2+ > Zn 2+, at initial concentration of 50mg/l, after 48 hours the concentration in substrate containing Pb 2+, Cu 2+ and Zn 2+ reduces to 2.8; 37.5 and 39.5mg/l, respectively and absorption efficiency reaches by 95; 25 and 21%. Although S. cerevisiae has shown to be very effective at removing heavy metal ions from aqueous solution, more research is needed to understand the metal binding mechanism. Also the investigation of absorption capacity for other heavy metals like Cr, Mn, Ni, Cd, Hg...; and for the heavy metals contaminated wastewater in practice are required.