ЕКОЛОГИЈА CAMPYLOBACTER spp. И ЊИХОВ ЗНАЧАЈ ЗА ЗДРАВСТВЕНО БЕЗБЕДНУ ХРАНУ

Transcription

1 Игор Стојанов. Јасна Проданов, Милош Капетанов, Драгица Стојановић, Јелена Петровић Научни институт за ветеринарство Нови Сад Оригинапни научни рад - Original scientific paper ЕКОЛОГИЈА CAMPYLOBACTER spp. И ЊИХОВ ЗНАЧАЈ ЗА ЗДРАВСТВЕНО БЕЗБЕДНУ ХРАНУ ECOLOGY OF CAMPYLOBACTER spp. AND THEIR IMPORTANCE FOR FOOD SAFETY Abstract Ecology of microorganisms is specific and it depends from their characteristics, but also from the conditions and the environment. In nature highly present Campylobacter jejuni/coli have different influence on the hosts and it may be said that they selectively cause intestinal disorders. Correlation between their presence in animals and safety of food is considerable, so the object of our research is bacteriological monitoring of clinical material deriving from poultry and pigs with the aim to detect presence of Camyplobacter spp. The results point to on the importance of these microorganisms. The microorganisms are present up to 70.00% in poultry and 53.33% in pigs what points on necessity of constant ecology monitoring of Campylobacter spp. Key words: Campylobacter jejuni/coli, ecology, food УВОД Контрола и праћење здравствене безбедности намирница анималног порекла има за циљ да открије све могуће агенсе и њихове изворе, који могу угрозити људско здравље. Микробиолошка контрола подразумева праћење присуства ових организама и спречавање појаве микробиолошки неисправне хране у исхрани људи. Према подацима доступним у литератури инфекције са Campylobacter jejuni/coli, узрочницима акутних гастроинтестиналних поремећеја, w=. 121

2 све су присутније и чине један од значајних здравствених проблема. Ове инфекције су изазване у највећем броју случајева храном која је бнл» контаминирана кампилобактерима, а животиње, које су носиоци овта микроорганизама, означене су као главни резрвоар ширења инфекције (6). Истраживања аутора у Енглеској и Велсу показују да су кампилобактер инфекције једне од-најчешћих узрочника обољења дигестивног тракта људи, а животиње, које представљају сировину за добијање намерница анималног порекла, главни носиоци ових микроорганизама (5). Према ауторима који су испитивали ову проблематику (11) најчешћи узрочници обољења људи када су у питању кампилобактер врсте су Campylobacter jejuni и Campylobacter coll. Од укупног броја инфекција 80-90% отпада на Campylobacter jejuni, док је 5-10% инфекција везано за Campylobacter coli. Важно је споменути да је довољно свега 5 х 10 ових микроорганизама, у недовољно термички обрађеној храни или прибору за обраду меса, да доведу до појаве инфекције. Праћење присуства патогених микроорганизама у намирницама анималног порекла је важно и са аспекта контролисања производа од њиве до трпезе. Неке од критичних контролоних тачака, које је неопходно испратити, су и анализе клиничких материјала животиња (материјали оболелих или сумњивих на болест животиња) које представљају сировине за намернице анималног порекла. У нашем раду смо као предмет истраживања имали бактерилошко праћење клиничких материјала пореклом од живине и свиња са циљем да утврдимо да ли се у њима налазе кампилобактер врсте, а пре свега Campylobacter jejuni и Campylobaacter coli као две најзначајније врсте одговорне за поремећаје дигестивног тракта и указивање на значај присуства ових микроорганизма. МАТЕРИЈАЛ И МЕТОДЕ Као материјал за испитивање користили смо делове дигестивног тракта и делове репродуктивних органа живине и црева свиња. Укупно је обрађено по 80 живинских материјала и 15 од свиња. Методологија је била прилагођена поступцима изоловања који су предвиђени за кампилобактер врсте. За изолацију кампилобактера користили смо Колумбија агар, коме је додато 5% дефинисане овчије крви и антибиотски селективни медијум (10) (biomerieux) који садржи Cefoperazona 3 мг, Colistina 2000 U, Vankomicina 2 мг и Amphotericina 0,4 мг на 200 мл подлоге. Микроаерофилни услови су обезбеђени уз помоћ гас паксистема истог произвођача. Након прављења препарта и бојења по Граму, теста оксидазе и каталазе (9), детерминација кампилобактера је обављена уз помоћ апистрипа (ApiCampy biomerieux). Читање резултата је изведено употребом одговарајућег софтвера. 122

3 РЕЗУЛТАТИ РАДА И ДИСКУСИЈА Од укупно 80 прегледаних материјала живине, 56 је било позитивно на присуство кампилобактер врста, од тога Campylobacter jejuni je заступљен у 39 и Campylobacter coli y 20 случаја. Узорци који су анализирани узети су од кока носиља да би се могло исконтролисати евентуално присуство кампилобактер врста у дигестивном тракт, али и у репродуктивном, јер би се њихов налаз могао повезати и са евентуалним присуством у јајима која су значајна намирница у исхрани људи. Ови резултати су представљали укупан налаз кампилбактер врста код испитиваних јединки. Код истих јединки после прегледа репродуктивног тракта 5 је било позитивно на кампилобактере и TO Campylobacter jejuni y 4 и Campylobacter coli y 1 узорку. (Табела 1.) Табела 1. Резултпатпи испитивања живинских материјала на присуство Campylobacter spp. Table 1. The results of examining presence of Campylobacter spp. In material deriving from poultry Врсте изолата Врста материјала Дигестив. тракт cekum + rectum Репродук.тракг uterus + magnum Број испитив. Укупно налаз Campylobacter jejuni Campylobacter coli (70,0%) (6,25%) 4 1 Резултати до којих смо дошли показују да су Campylobacter jejun/coli заступљени са 70,00% у испитиваним материјалима, мада се према подацима из литературе (2) може видети да могу бити и 100% присутни у јатима. Овакви резултати указују на високу заступљеност кампилобактера код живине и да се може очекивати сличан резултат до којег су дошли исти аутори (2). Они су утврдили да је после клања пилића из јата која су заражена кампилобкатером, овај микроорганизам изолован у истом проценту као и код живих. Налаз у појединим вспитиваним органима показује да су кампилобактери приустни поред дигестивног тракта и у паренхиматозним органима и у репродуктивном тракт. До сличних података дошли су аутори (4) који су испитивали поједине делове репродуктнвног тракта на присуство кампилобактера. Њихови налази Campylobacter jejuni y репродуктивном тракту су већи од наших (54,4% позитивних) са тим да је упоредно испитивање указало да је проценат позитивних налаза највећи у вагиналном делу (доњи делови) (78,68%) и да опада према инфандибулуму (горњи делови репродуктивног тракта) (54,09%). Испитивање ножева као опреме која се користи током обраде меса закланих животиња показао је да се поред других микроорганизама и Campylobacter може наћи на њима. Ова чињеница је једна од важних јер ивфекција кампилобактером може настати не само недовољно термички обрађеним месом већ и преко опреме и прибора који се користи у непосредној 123

4 исхрани. Аутори овог рада (7) су утврдили да опасност од кампилобактера није дужа од 4 сата јер се после тог периода ови микроорганизми не могу више изоловати са површина ножа. Значај присуства кампилобактера у клиничким изолатима (изолати ИЗ материјали оболелих или сумњивих на болест животиња) је и у чињеници ЈВ високо присуство ових организама код живине доводи и до високог присуства на труповима заклане живини. Према истраживањима (1) Campylobacter jejuni je изолован на кожи трупова живине у 76,7% случајева. Њихов проценат после 2- часа у условима расхлађивања се смањује, али и даље остаје присутан са 25,6%. Анализирајући појаву кампилобактер инфекције у Ирској (12), утврђено је да је просек од 57,5 / становника већи од просека у Европи 9, Као главни резервоар инфекције озанчени су производи од живинског меса. Присуство Campylobacter jejuni/coli у месу је био различит и кретао се код: товљених бројлера 49,9%, ћурећег меса 37,5% и пачијег 45,8%, док је месо говеда 3,2%, свиња 5,1% и јагњади 3,2% било мање контаминирано овим мифоорганизмом. Током испитивања црева свиња (ileum) укупно је обрађено 15 материјала. Обрађени материјали су били пореклом од животиња које су имале клиничке симптоме гастроинтестиналних сметњи. Патоанатомски налаз се карактерисао присуством веће количине слузи са примесама крви у цревном садржају и са иницираним крвним судовима мукозе. (Табела 2.) Табела 2. Резултати испитивњја материјала свиња на присуство Campylobacter spp. Table 2. The results of examining presence ofcamyplo. spp. In material deriving from pies Врсте изолата Број испитиванј а Укупно позитивних налаз Врста материјал Campylobacte r jejuni Дигестив. тракт ileum 15 8 (53,33%) 8 - Campylobact e r coli Када се пореде резултати до којих смо дошли у току нашег рада са резултатима других аутора (8) можемо уочити разлику. Проценат позитивних налаза на Campylobacter jejuni/coli y њиховим испитивањаима је био 100% из дигестивног тракта и 66,7% са тонзила. Испитивња других аутора указују на присуство и других врста кампилобактера при чему се за неке врсте (С. hyointestinalis) може тврдити да предстваљају део патогене флоре дигестивног тракта свиња, али за неке (С mucosalis) није у потпуности утврђено да ли имају та својства. (9). Праћење екологије кампилобактер врста важно је и са аспекта могућег ширења са животиња на људе и обрнуто када се налазе у међусобној вези као што је производња. Истраживањем аутора (3) код оваца присуство кампилобактера утврђено је код 66% испитаних јетри (Campylobacter jejuni), али се каснијом анализом узорака радника, који су радили на фарми, утврдило да 61,1% изолованих кампилбактера припадало истом серотипу. 124

5 ЗАКЉУЧАК 1. Присуство кампилобактер врста је потврђено у материјалима пореклом од живине и свиња. Заступљеност ових микроорганизам у испитиваним материјалима варира у зависности од разлога испитивања и начина узорковања. 2. Еколошки аспект присуства кампилобактера у природи и њихов утицај на макрооргангоме је различит. Промене које се јављају код инфцираних људи су далеко веће по обиму и значају у односу на промене које се могу уочити код живитоња које су носиоци овог микроорганизма. Ове разлике могу указати на еколошку изолованост људске популације и повећање њихове осетљивости на кампилобактер врсте. 3. Потреба за здравствено безбедном храном намеће захтев успостављања система преко контроле критичних тачака (НАССР) у производњи и то од њиве до трпезе. Чини се да је појам безбедне хране сувише свеобухватан, јер примера ради, микробиолошка исправност или исправност у некој другој испитиваној карактеристици не значи да је храна безбедна. Она је само исправна са становишта правилника који одређују границе дозвољеног, које је опет прописао сам чоаек. Пошто су те норме променљиве у зависности од времена и потреба тешко је говорити о здравствено безбедној харане са становишта онога што прирола захтева. ЛИТЕРАТУРА /. Alter Thomas, Florian Gaull, Annekathrin Froeb and Karsten Fehlhaber.: Distribution of Campylobacter jejunu strains at different stages of a turkey slaughter line.. Food Microbiology Volume 22, Issue 4, Pages , Berndtson E., M. -L. Danielsson-Tham and A. Engvall.: Campylobacter incidence on a chicken farm and the spread of Campylobactr during the slaughter process, ч Internetional Journal of Food Microbiology, Volume 32. Issues 1-2. Pages 35-47, Cornelius AJ., C. Nicol and J.A. Hudson.: Campylobacter spp. in New Zealand raw sheep liver and human campylobacteriosis cases.. International Journal of Food Microbiology., Article in Press, Corrected Proof, Copyright Elsevier B.V Di Modugno, G., Nasti, R. and Camarda, A.; Isolation of Campylobacter jejuni from laying hens oviduct: Preliminary researches. 5. Poultry and food safety., COST Action 97, Pathogenic micro-organisms in poultry and eggs, XI International Congress of the World, pages , Gillespie A. Iain and The Campylobacter Sentinel Surveillance Scheme Collaborators.: Is Campylobacter jejuni enteritis a weekend disease! Journal of Infection. Article in Press, Corrected Proof, ed 15 February 2004., Copyright, ElsevierB.V Kanako Ishihara, Tomoko Kira, Kaori Ogikubo, Ayako Morioka, Akemi Kojima, Mayumi Kijima-Tanaka, Toshio Takahashi and Yutaka Tamura,: Antimicrobial susceptibilities of Campylobacter isolated from food-producing animals on farms 125

6 ( ): results from the Japanese Veterinary Antimicrobial Resistance Monitoring Program, International Journal of Antimicrobial Agents. Volume 24. Issue 3. Pages , Kusumaningrum D. H., G. Riboldi, W. C. Hazeleger and R. R. Beumer.: Survival of foodborne pathogens on stainless steel surfaces and cross-contamination to foods, International Journal of Food Microbiology. Volume 85. Issue 3. Pages , Nesbakken Truls, Karl Eckner, Hilde Kristin H0idal and Ole-Johan R0tterud.: Occurrence of Yersinia enterocolitica and Campylobacter spp. in slaughter pigs and consequences for meat inspection, slaughtering, and dressing procedures, International Journal of Food Microbiology.Volume 80. Issue 3. Pages , Pener L. John; Campilobacter, Helicobacter and Related Spiral Bacteria, Chapter 39. In Lennette, Albert Balows et al.(editors), Manual of Clinical Microbiology, 5th Ed. pp: , (1991) 10. Quinn J. P., Carter E. M., Markey B., Carter R.G.: Clinical Veterinary Microbiology and Diesaes; Mosby, London, Philadelphia, St. Luis, Sydney, Tokyo, 2002 //. Ronner Anna-Clara, Eva Olsson Engvall, Linda Andersson and Bertil Kaijseni Species identification by genotyping and determination of antibiotic resistance in Campylobacter jejuni and Campylobacter coli from humans and chickens in Sweden., Volume 96. Issue 2, Pages , Whyte P., K. McGill, D. Cowley, R. H. Madden, L. Moran, P. Scales, C. Carroll, A. O'Leary, S. Fanning, J. D. Collins, E. McNamara, J. E. Moore and M. Cormican.: Occurrence of Campylobacter in retail foods in Ireland., International Journal of Food Microbiology, Volume 95. Issue 2, Pages ,2004.