Internationales Rules for

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1 Reglas Règles International Internacionales Internationales Rules for para pour Seed el les Testing Análisis Essais de las Semillas Semences Internationale Vorschriften für die Prüfung von Saatgut 2017 Méthodes validées pour analyse sanitaire des Validated Seed Health Testing Methods semences Validierte Methoden zur Gesundheitsprüfung von Saatgut 7 016: Nachweis Détection Detection de of von complexe Phomopsis-Komplex de complex in an Glycine sur Samen semences max (soybean, von de Glycine soya max bean) max (Sojabohne) seed (soja) Incluye Inklusive Inclus Including les cambios Änderungen changes changements y correcciones and und editorial de redaktionelle règles corrections editoriales et Korrekturen adoptadas adopted éditoriales at verabschiedet en the la adoptées auf der lors Reunión Ordinary ordentlichen la General réunion Generalversammlung Anual Meeting annuelle 2016, 2017, générale Tallinn, Denver, 2017, Estonia 2017, USA Denver, États-Unis USA Gültig Effectives A partir ab del from 1. au 1 Januar de 1er 1 January enero janvier

2 Validierte Chapter Méthodes 7: Methoden validées Validated pour zur Seed Gesundheitsprüfung analyse Health sanitaire Testing Methods des von semences Saatgut Reglas Internationale Règles Internacionales Internationales Vorschriften International para pour für el les die Análisis Rules Essais Prüfung for de de Seed von las Semences Semillas Saatgut Testing Validierungsstudien Études Validation de reports validation Siehe Voir See Références. References. Literaturquellen. Les Copies copies Kopien are sont available sind disponibles erhältlich by au per secrétariat from the de ISTA l ISTA Secretariat par courriel at durch ista.office@ista.ch. das ISTA-Sekretariat. 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Limitation Disclaimerde responsabilité Haftungsausschluss En Whilst dépit ISTA du soin has pris taken par care l ISTA to pour ensure assurer the accuracy l exactitude of des the Obgleich méthodes methods and die et ISTA des informations mit Sorgfalt described auf contenues die in Richtigkeit this dans method la der descrip- in diesetion, Methodenbeschreibung des ISTA méthodes, shall not l ISTA liable décline angegebenen for any toute loss responsabilité or Methoden damage, pour und etc. In toute resulting for mationen perte from ou the dommage, achtet, use haftet of this etc., sie method. résultant nicht für de jeglichen l utilisation Verlust, de la Schaden présente méthode. etc., der aus der Verwendung dieser Methode resultiert. Sicherheitsmaßnahmen Sécurité Safety precautions Der Assurez-vous Ensure sichere you Umgang are de connaître familiar mit Gefahren les with risques hazard im et mikrobiologischen data prenez and les take me- Labor sures appropriate und de sécurité die safety die Berücksichtigung precautions, appropriées. especially entsprechender Il est supposé during Vorsichts- que weighing Vorsichtsmaßnahmen, méthode out of ingredients. est pratiquée insbesondere It dans is assumed un während laboratoire während that der persons der Herstellung microbiologie carrying der cette der Kulturmedien, par out des this personnes test are dem in dem familières Autoklavieren a laboratory des principes suitable und und Auswiegen for Auswiegen de carrying bonnes der pratiques microbiological de laboratoire, sind sind procedures zu zu gewährleisten. de bonnes and pratiques familiar Es Es wird with wird de vorausgesetzt, microbiologie, the vorausgeset- principles Bestandteile, der out Be zt, dass et of Good des dass diese techniques Laboratory diese Arbeitsschritte d asepsie. Practice, in einem Good Tous einem mikrobiologischen Microbiological les déchets doivent Practice, Labor être Labor durch traités and aseptic Mitarbeiter d une durch manière techniques. Mitarbeiter durchgeführt appropriée durchgeführt Dispose werden, (par of all exemple werden, die waste mit autoclavage, den materials die Prinzipi- mit den Prinzipien désinfection) an der appropriate Guten der et Laborpraxis, Guten way selon (e.g. Laborpraxis, des règlements autoclaving, Guten Mikrobiologischen Guten locaux disinfection) de sécurité. and Praxis in Praxis und accordance der und sterilen der with sterilen Arbeitstechnik local Arbeitstechnik health, vertraut environmental vertraut sind. Alle sind. Abfallstoffe and Alle safety Abfallstoffe sind regulations. auf geeignete sind auf geeignete Weise und Weise entsprechend und entsprechend der vor Ort der üblichen Ort Gesundheits-, üblichen Gesundheits-, Sicherheits- Sicherheits- und Umweltbestimmun- und Umwelt- vor bestimmungen zu entsorgen zu (z. entsorgen B. durch Autoklavieren, (z. B. durch Desinfizieren). Autoklavieren, Desinfizieren). Anmerkung Note on the use zur Benutzung of the translations der Übersetzungen Remarque sur l utilisation des traductions Die The elektronische electronic version Version of the enthält International die englische, Rules französische for Seed Testing und deutsche includes the Version English, der ISTA-Vorschriften. La French version and électronique German Bei versions. irgendwelchen des règles If If there there inclue are Fragen are any les any questions versions bezüglich en on der interpretation anglais, Interpretation en français of the der of et ISTA-Vorschriftemand. the English Pour the ist English version die toute englische question version the definitive Version is d interprétation the definitive die version. massgebliche des version. règles, Version. seule la version anglaise fait the en Rules, alle- Rules, foi. Herausgegeben von der: Internationalen Éditées par : Vereinigung für Saatgutprüfung (ISTA) Zürichstr. L Association 50, 8303 Internationale Bassersdorf, d Essais Schweiz de Semences (ISTA) Zürichstr. Publicado 50, por8303 Bassersdorf, Suisse 2018 The Published International by Seed Seed Testing Association (ISTA) (ISTA) 2018 Zürichstr. The International par 50, l Association CH-8303 Seed Bassersdorf, Testing Internationale Association Suiza d Essais (ISTA) de Semences (ISTA) Online Zürichstr. ISSN 50, CH-8303 Bassersdorf, Switzerland Online 2017 ISSN International Seed Testing Association (ISTA) Titel 2018 der International englischen Originalausgabe: Seed Testing Association International (ISTA) Rules for Seed Testing Titre Online de ISSN l édition originale anglaise : International Rules for Seed Testing Alle Online Rechte ISSN vorbehalten Kein Teil dieses Werkes darf in irgendwelcher Form oder durch Tous irgendwelchem Todos droits los derechos réservés. Verfahren, reservados. Aucune sei partie Ninguna elektronisch, de cette parte mechanisch, publication de ésta publicación ne durch peut Fotokopie être puede reproduite, ser oder reproducida, All rights almacenada dans oder reserved. le système durch en irgendein No ningún part récupération sistema of anderes this publication ou Verfahren recuperación être transmise may reproduziert, be reproduced, trasmitida sous aucune gespeichert de stored cualquier forme in oder ou any forma par verbreitet retrieval aucun o en Tonaufnahme stockée moyen, werden, cualquier system or électronique, ohne medio, transmitted vorherige electrónico, mécanique, in any schriftliche form mecánico, or photocopiant, by Genehmigung any fotocopia, means, enregistrant grabación electronic, der Internationalen o ou de mechanical, autrement, cualquier Vereinigung otro photocopying, sans tipo, permission Saatgutprüfung. permiso recording antérieure previo or otherwise, y par por écrit escrito without de l ISTA. de prior la ISTA. permission in writing from sin für el ISTA A partir Effectives Gültig del ab 1 1. de er January janvier enero

3 Règles Reglas Internationale Internationales Internacionales Rules Vorschriften for Seed pour para für les Testing el die Análisis Essais Prüfung de Semences von las Semillas Saatgut Validierte Méthodes Chapter Methoden validées 7: Validated pour zur Gesundheitsprüfung analyse Seed sanitaire Health Testing des von semences Methods Saatgut 7 016: : Nachweis Detection Détection of von de complexe Phomopsis-Komplex de complex in an Glycine sur Samen max von semences (soybean, Glycine soya de max Glycine bean) (Sojabohne) seed max (soja) Wirtspflanze: Hôte Host: : Glycine Glycine max (L.) max Merr. (L.) Merr. Krankheitserreger: Pathogen(s): Pathogène(s) : Phomopsis Phomopsis longicolla longicolla Hobbs, Diaporthe Hobbs, phaseolorum Diaporthe phaseolorum var. sojae sojae (Lehm.) var. (Lehm.) sojae Wehm. Wehm. (Lehm.) (Stade(Imper- fect P. state phaseoli P. phaseoli (Desm.) P. phaseoli Sacc., (Desm.) syn. (Desm.) Sacc., P. sojae Sacc., syn. Lehmann) P. syn. sojae P. ; Wehm. imparfait (Nebenfruchtform sojae Diaporthe Lehmann); Lehmann); phaseolorum Diaporthe Diaporthe phaseolorum (Cke. & Ell.) (Cke. Sacc. & f. Ell.) sp. caulivora Sacc. f. sp. (DPC), caulivora syn. (DPC), D. phaseolorum syn. D. phaseolorum var. caulivora var. caulivora Athow & Caldwell Athow & Caldwell Prepared Erstellt Auteurs durch: : R.R. by: International Walcott Seed Health Initiative for Field University Crops, of ISF Georgia, Athens GA 30602, États-Unis. Courriel : rwalcott@arches.uga.edu Author: Autoren: R.R. Walcott Préparé University par : of International Georgia, Athens Seed Health GA 30602, Initiative USA. Field Crops rwalcott@arches.uga.edu Revisionsstand Historique history de la révision Version 1.0, Version 1.1, : : redaktionelle Editorial Préparation change Änderungen l APDA to APDA : zur preparation: correction APDA de Vorbereitung: correction la pression of d autoclave Korrektur autoclaving des : pressure modification Version Autoklavierdruckes éditoriale 1.2, : Definition of sample size Version 1.2, 1.3, : : : Definition Addition Définition of der positive la Probengröße taille control; de Version common l échantillon 1.3, : name of host Positivkontrolle added hinzugefügt; Version deutscher 1.3, 1.4, : Name der Wirtspflanze : Ajout Reporting de contrôle results hinzugefügt positif revised; ajout Version de nom 1.4, commun : de l hôte Berichterstattung der Ergebnisse überarbeitet 1.4, : «Indications des résultats» Version révisé Background Hintergrund Historique This method for the detection of Phomopsis seed decay in Soya beans uses direct plating on acidified potato dextrose agar Diese (APDA) Methode with zum visual Nachweis identification von Phomopsis-Samenfäule of subsequent fungal bei Cette growth. Sojabohnen méthode It de replaces nutzt détection die the direkte de original la pourriture Plattenkultur working des sheet semences auf publisherem due à Kartoffel-Dextrose-Agar Phomopsis in the ISTA sur Handbook soja utilise (APDA) of l ensemencement Seed bei Health visueller Testing direct Iden- in sau- November tifikation sur potato des dextrose 1964 anschließenden as agar S.3. acidifié No. 27 Pilzwachstums. (APDA) (Wallen, avec 1964) Sie identification das ursprüngliche visuelle and third de la editions croissance Methodenblatt, prepared mycélienne by veröffentlicht Kulik en résultant. (1981, im 1989). ISTA Elle and ersetzt the second This remplace Handbook version la of méthode of Seed the Health assay publiée contains Testing dans im several le November ISTA changes Handbook 1964 to the als on previous Seed S.3. No. Health 27 method (Wallen, Testing, descriptions 1964) novembre und following die 1964, zweite S.3 the und n o results 27 dritte (Wallen, Ausgabe, erstellt comparing et les seconde von two Kulik et methods (1981, troisième 1989). using éditions four Diese préparées replicates Version par der of of a 1964) study Kulik four Untersuchung seedlots (1981, in 1989). beinhaltet six independent Cette einige version Änderungen laboratories des tests zu in contient den Argentina, vorhergehenden modifications Methodenbeschreibungen. Canada, France par rapport and the aux USA Sie méthodes berücksichtigt (Walcott, décrites et al., die certaines Australia, précédemment 2003). Ergebnisse The einer changes suite Studie include: aux zum résultats the Vergleich use d une of zweier APDA étude comparant instead Methoden of 2 malt unter méthodes agar Nutzung or en amended utilisant von vier 4 water répétitions Wiederholungen agar; surface 4 lots von disinfestation de vier semences Saatgutpartien 16 % laboratoires NaOCl in sechs for unabhängigen indépendants 30 s instead Laboren of Argentine, 2 % for Argentinien, 10 Australie, min, fol- dans with Canada, lowed Australien, by France a 30 Kanada, s rinse et aux Frankreich in États-Unis sterile water; und (Walcott, den plates USA are et (Walcott al., incubated 2003). et Les in al., the 2003). modifications dark Die 25 Änderungen C comprennent for 7 d enthalten: before l utilisation evaluation. die Verwendung APDA von au lieu APDA du anstatt malt agar von ou Malz-Agar de l eau gélosée, oder modifiziertem la désinfection Wasser-Agar; die Oberflächendesinfektion mit 1 % NaOCl für de 30 s anstatt von 2 % für 10 min, mit anschließender Spülung für 30 s in sterilem Wasser; die Inkubation der Platten in Dunkelheit bei 25 C für 7 d vor der Auswertung. Behandeltes Treated seed(gebeiztes) Saatgut surface avec du NaOCl à 1 % pendant 30 s au lieu de of 2 % pendant 10 min, suivie d un rinçage pendant 30 s avec de l eau Saatgutbehandlungen Seed treatments stérile ; les may boîtes affect können sont the incubées die performance Aussagekraft à l obscurité of dieser this à test. 25 Methode should beeinflussen. only 7 jours performed avant Die la Untersuchung notation. on untreated sollte seed. nur mit unbe- C It pendant handeltem Saatgut durchgeführt werden. Semences Materials traitées Material Les Reference traitements material: peuvent reference affecter la cultures performance other de appropriate Elle ne devrait Referenzkulturen être appliquée que oder sur andere semences geeig- non la méthode. Referenzmaterial: Acidified traitées. nete Materialien PDA plates: 90 mm Petri dishes (one per ten APDA-Platten: seeds) 90 mm Petrischalen (eine Platte für 10 Incubator: Samen). operating at 25 ±2 C Sterile Inkubator: Materiel paper Betrieb towels: bei for 25 blotting ±2 C. seed dry Sterile Papierhandtücher: distilled/deionised water Für das Abtrocknen der Samen. 1 Steriles Matériel % NaOCl destilliertes/deionisiertes référence : cultures Wasser de référence ou autre Forceps 1 % matériel NaOCl (tweezers) approprié Timer Pinzetten Boîtes de PDA acidifié : boîtes de 90 mm de diamètre ph Zeitschaltuhr (une meter boîte pour 10 semences) ph-meter Étuve : capable de maintenir une température de 25 ±2 C Papier stérile : pour placer les semences à sec Sample Eau distillée/désionisée preparation Probenvorbereitung NaOCl 1 % It Pinces is vital to exclude any possibility of cross-contamination Es between Minuteur ist wichtig, seed samples. jede Möglichkeit This can be einer achieved Kreuzkontamination ph-mètre zwischen equipment den Samenproben and gloved auszuschließen. hands with 70 % Das ethanol. kann by swabbing/ spraying durch The Abtupfen/Besprühen test is carried out der on Ausrüstung a working sample und der of Handschuhe as mit described 70-prozentigem in Section Ethanol erreicht of the werden. International 400 seeds Préparation Rules Der for Test Seed wird Testing. mit de einem l échantillon Probenumfang von 400 Samen durchgeführt wie es im Kapitel der ISTA-Vorschriften Il beschrieben est essentiel ist. d exclure toute possibilité de contamination croisée Methods entre les échantillons de semences. Ceci peut être réalisé en essuyant ou pulvérisant les équipements avec de Methoden l éthanol Critical control à 70 %, points en utilisant are indicated des gants. by CCP. Le test est réalisé sur un échantillon de travail de 400 Kritische semences, 1. Pre-treatment: Kontrollpunkte comme décrit Gently sind dans rinse mit la seeds section KKP in gekennzeichnet NaOCl des solution Règles ISTA. (1 % available chlorine) for 30 s, then rinse for 30 s in 1. Vorbehandlung: sterile water. Blot Behutsam the seed dry die on Samen sterile in paper NaOCl-Lösung Plating: (1 % Using freies aseptic Chlor) technique, für 30 s, dann evenly für 30 space s in seeds steri- towels. 2.1 Méthodes lem on the Wasser surface spülen. of the Die acidified Samen PDA mit plates den sterilen (10 seeds Papierhandtüchern plate). abtrocknen. per Les Ausplattieren: Positive points critiques control Unter de contrôle (reference sterilen sont Bedingungen material): indiqués par Aseptically werden CCP. die Samen place seeds gleichmäßig in an appropriate auf der Oberfläche number der of plates APDA-Plattetain (10 the Samen reference : je rincer Platte) culture, les ausgelegt. semences or plate a dans reference la solution culture de to ob- 1. Prétraitement 2.2 NaOCl Positivkontrollen on media. (chlore The number disponible (Referenzmaterial): of 1 plates %) pendant required Unter 30 will s et sterilen depend rincer pendant Bedingungen on the level 30 s dans of die contamination Samen l eau stérile. einer Les of entsprechenden the faire positive-control sécher sur Anzahl seed stérile. von lot. Petrischalen verteilen, um eine Referenzkultur papier 3. zu Incubation: erhalten oder Incubate eine Referenzkultur plates for 7 d at auf 25 dem ±2 C Medium in the auslegen. dark. 3. Inkubation: Die Platten für 7 d bei 25 ±2 C in Dunkelheit inkubieren. Gültig A Effectives partir ab del 11. 1January 1 er de janvier enero

4 Validierte Chapter Méthodes 7: Methoden validées Validated pour zur Seed Gesundheitsprüfung analyse Health sanitaire Testing Methods des von semences Saatgut Reglas Internationale Règles Internacionales Internationales Vorschriften International para pour für el les die Análisis Rules Essais Prüfung for de de Seed von las Semences Semillas Saatgut Testing Kontrolle: Ensemencement Control: Subculture Eine Referenzkultur : disposer a reference aseptiquement auf culture einer onto APDA-Platte les semences a plate of subkultivieren bien acidified espacées PDA dans und and incubate mit chaque den boîte Testplatten with de the Pétri test inkubieren. sur plates. surface Alternatively, PDA kann acidifié a sample eine (10 Probe of semences seed von known Samen par boîte). to mit be bekannter infested may In- Alternativ du 2.2 fektion Contrôle be surface oberflächensterilisiert, positif sterilised, (matériel plated de on référence) auf acidified APDA : ausgelegt Placer PDA and les und semencecubated denselben under manière the Bedingungen same aseptique conditions et wie répéter die as the avec Untersuchungs- test un samples. nombre in- unter 5. proben approprié Examination: inkubiert de boîtes Examine werden. pour obtenir the plates culture after 3 de and référence, 7 d incubation déposer using une Die a culture dissecting Platten de sind microscope référence nach 3 und sur or 7 milieu. hand d Inkuba- lens Le 5. Auswertung: ou tion nombre at 5 unter to de 10 Verwendung boîtes magnification. requis eines dépend Compare Stereomikroskopes du niveau with de control contamination einer record Handlupe du the lot number de semences bei of 5 infected bis servant 10 seeds Vergrößerung de contrôle each plate. positif. zu prü- In- oder and 3. Incubation fen. fected Im seeds Vergleich : are incuber usually mit der les overgrown Referenzkultur boîtes pendant by a dense, ist 7 die jours white, Zahl à der 25 floccose ±2 infizierten C mycelium à l obscurité. Samen which auf jeder often Platte contains zu ermitteln. black, globose fruiting : repiquer Samen bodies sind une (pycnidia) üblicherweise culture and/or de référence mit black einem stromatic sur dich- une Die 4. infizierten Témoin ten, boîte bodies weißen, de (Fig. PDA flockigen 1). acidifié Pycnidia en Myzel même are usually überwachsen, temps short-beaked, que le welches dépôt des but oft schwarze, semences the length et kugelförmige of incuber the beak avec may Fruchtkörper les boîtes vary considerably. d essai. (Pyknidien) Par ailleurs, Spore und/ oder un exudate échantillon schwarze usually Stroma-Körper de accumulates semences as connu enthält a straw-yellow pour (Abb. être 1). Die droplet infecté Pyknidien pourrait at the tip sind être of gewöhnlich stérilisé the beak, en but surface, mit occasionally einem déposé kurzen sur in schnabelförmigefié a cirrhus. et incubé Fortsatz At dans high versehen, les magnification mêmes aber conditions die two Länge kinds que des of les Fortsatzes conidia échan- the PDA form acidi- of kann tillons may beträchtlich en seen. test. Alpha variieren. conidia Gewöhnlich are hyaline, tritt non-septate, ein Sporenexudat Lecture rounded : at observer in both Form ends les strohgelber boîtes (although après Tröpfchen some 3 et 7 jours may im d incuba- have oberen one 5. Bereich tion end more en utilisant der drawn Bohnen un out microscope aus, than gelegentlich the other), ou une auch straight loupe als à to Cirrhus. grossissemensoidal starker (Fig Vergrößerung 2, left), Comparer können au témoin Arten et noter µm. von le Konidien Beta nombre co- ellip- Bei gesehen de nidia semences are werden. long infectées and Die needle-shaped, Alpha-Konidien sur chaque sometimes boîte. sind Les hyalin, semences curved unseptiert, infectées hooked, hyaline, an sont beiden généralement Enden gerundet recouvertes (obwohl µm d un (Fig. mycélium einige 2, right). an or einem dense, The majority blanc, Ende mehr floconneux of pycnidia in die avec Länge produce souvent gezogen only des alpha sein éléments conidia, können de als fructification a few die produce anderen), noire alpha gerade globuleux conidia oder (pycnides) elliptisch with some (Abb. et/ou beta 2a), des conidia, stroma rarely noirs beta (Fig. conidia 1). µm. Les are Die pycnides produced Beta-Konidien ont alone généralement (see sind also: lang un Mc- und col nadelförmig, court, Gee, 1991)(CCP). mais la taille manchmal du col peut gebogen varier oder considérablement. hakenförmig, hyalin, L exsudat The long-beaked, de conidies black, s accumule µm globose (Abb. généralement 2b). perithecia Die Mehrheit en formant Diaporthe Pyknidien une gouttelette phaseolorum, bildet nur jaune the Alpha-Konidien, paille perfect à state l extrémité of bei Phomopsis wenigen du col, of der werden et phaseoli, occasionnellement Alpha-Konidien are not usually mit forme encountered einigen de cirrhe. Beta-Konidien plated A fort seeds grossissement, from lots werden produced 2 types in den in Fruchtkörpern conidies areas free peuvent of ausschließlich stem être canker. observées. As- Be- und selten ta-konidien Les cospores conidies are gebildet hyaline, alpha sont (siehe 1-septate hyalines, auch: but McGee, non may septées, 1991)(KKP). appear arrondies 3-septate, aux langschnäbligen, 2 extrémités with 1 2 drops (bien schwarzen, que in each certaines kugelförmigen half puissent of the spore, avoir Pe- to be Die rithezien une which extrémité is either von plus ellipsoidal Diaphorte allongée with phaseolorum, que the les ends autres), slightly der droites Hauptfruchtform ellipsoïdales ed and slightly von (Fig. to Phomopsis noticeably 2, gauche), phaseoli, constricted 4,5 11,0 treten at 1,5 3,5 the gewöhnlich septum, µm. point- à nicht Les conidies auf Platten beta mit sont µm ausgelegten longues to et Samen forme auf, d aiguille, die µm, aus or Partien parfois sometimes aus courbées Gebieten, broadly ou fusiform en frei forme von and Stängelkrebs, de then crochet, often stammen. hyalines, curved Die 7,5 35,0 with Askosporen no constriction 0,8 1,8 sind µm and hyalin, (Fig. obtuse 2, einfach droite). at each septiert, end, La majorité bisweilen pycnides dreifach µm. produisent septiert seulement vorkommend, des conidies mit 1 2 Tropfen alpha, peu in des jeder produisent Hälfte des der conidies Spore, die alpha von avec elliptischer quelques Form, conidies mit schwach beta, les conidies zugespitzten beta Enden sont rarement und schwach produites sichtbaren seules General Einschnürungen (voir aussi methods : McGee, am 1991)(CCP). Septum, µm groß Les périthèces sind. Sie können de Diaporthe auch manchmal phaseolorum, breit spindelförmibuleux sein tolerances: avec und un dann long oft Tolerances col, gebogen, du stade ohne provide parfait Einschnürung a de means Phomopsis of und as- noirs, glo- Checking stumpf phaseoli, sessing an whether ne jedem sont Ende, or pas not fréquemment the variation trouvés in results µm. sur within essais de or between semences tests de lots are produits sufficiently dans wide des as zones to raise saines. doubts Les ascospores about the accuracy sont hyalines, of the avec results. 1 septa Suitable mais tolerances, semblent Allgemeine avoir which 3 can septae be avec applied Methoden 1 2 to gouttelettes most direct dans seed chaque health moitié tests, des can spores, be found qui in sont Table soit 5B ellipsoïdales Part 1 of Chapter avec les extrémités ISTA pointues Rules, der et or peu Table Toleranz: ou G1 un in peu Miles Toleranzen plus (1963). resserrées erlauben septa, eine 5 of the Überprüfung 4,4 6,3 Abschätzung, 1,6 2,1 ob µm die à Variation 8,6 11,8 der 3,0 3,9 Ergebnisse µm, ou eines parfois Testes fusiformes oder results: zwischen et The souvent verschiedenen result courbées of a sans Tests seed resserrement ausreichend health test Reporting should et groß obtuses ist indicate oder à chaque nicht, the extrémité, um scientific an der 7,5 10,5 Genauigkeit name of the 2,0 2,7 der pathogen Ergebnisse zu and zweifeln. the test Eine method Toleranztabelle, used. When reported die für die on µm. detected an meisten ISTA direkten Certificate, Saatgut-Gesundheitsprüfungen results are entered under Other angewendet werden kann, findet sich in Tabelle 5B Teil Determinations. 1 Méthodes générales The des Kapitels report must 5 der indicate ISTA-Vorschriften, the number of oder seeds in tested. Tabelle In G1 the in Miles case of (1963). a negative result (pathogen not detected), Vérification the results des must tolérances be reported : Les as not tolérances detected. fournissent Berichterstattung In des the moyens case of d évaluer a positive der Ergebnisse: result, la variation the Der report du Ergebnisbericht résultat must indicate dans ou the entre einer percentage les Gesundheitsprüfung essais of est infected suffisante seeds. von pour Saatgut s assurer sollte de den l exactitudsenschaftlichen des résultats. Name Des des tolérances Krankheitserregers appropriées, und qui die wis- peuvent verwendete être Methode appliquées enthalten. à la plupart Bei des Berichterstattung essais d analyse Quality sanitaire auf einem directs, assurance ISTA-Bericht peuvent sind être die trouvées Ergebnisse dans unter le Tableau Weitere Partie Untersuchungsergebnisse 1 du Chapitre 5 des Règles einzutragen. ISTA, ou dans la 5B Specific Tableau Der Prüfbericht G1 training du Miles muss (1963). die Anzahl untersuchter Samen angeben. This Indication Im test Falle should des eines résultats only negativen be performed : Le Ergebnisses résultat by d un persons (Krankheitserreger trained sanitaire nicht in nachgewiesen), fungal des semences identification müssen devrait or die under indiquer Ergebnisse their le direct nom als essai who de have qualité been supervision. scientifique nicht nachgewiesen du pathogène berichtet détecté werden. et la méthode d essai employée. Im Falle eines Les positiven résultats sont Ergebnisses écrits dans sollte «Autres der Prüfbericht den Prozentsatz» dans le Bulletin infizierter ISTA. Samen angeben. déterminations Critical Le rapport control doit indiquer points le nombre (CCP) de semences testées. Dans le cas d un résultat négatif (pathogène non détecté), should les résultats be taken doivent not être to mistake rapportés the comme acervuli «non of Care Qualitätssicherung Colletotrichum détecté». dematium (Pers. ex Fr.) Grove var. truncata Spezifische Dans le (Schw.) cas d un Ausbildung Arx résultat or the positif, perithecia le rapport of doit Glomerella indiquer glycines le pourcentage (Hori) Lehman de semences & Wolf, infectées. for the perithecia of D. phaseolorum Diese Untersuchung or the pycnidia sollte nur of durch P. phaseoli. Personen These ausgeführt fruiting bodies werden, are die also entsprechende dark but they Erfahrungen are usually bei not der in Identifikation Assurance von floccose pilzlichen mycelium qualité Erregern as haben is the case bzw. with unter those der direk- of D. a dense, white, phaseolorum ten Anleitung and einer P. Person phaseoli. stehen, In die addition, die entsprechenden there are no dark Kenntnisse Formation setae (sterile besitzt. spécifique hairs) associated with the fruiting bodies of Phomopsis spp. (Step 5). Ce test ne devrait être effectué que par des personnes formées à d identification Kontrollpunkte fongique ou (KKP) sous la supervision de Kritische Media personnes qui and l ont solutions été. Es ist darauf zu achten, dass keine Verwechselungen für die Acidified Perithezien von potato D. phaseolorum dextrose oder agar die Pyknidien (APDA) von P. Points phaseoli critiques mit den Acervuli de contrôle von Colletotrichum (CCP) dematium (McGee, (Pers. ex. 1986, Fr.) Grove 1991) var. truncata (Schw.) Arx oder den Perithezien Attention von à ne pas Glomerella confondre glycines les acervules (Hori) de Lehman Colletotrichum & Wolf vorliegen. Potato dematium dextrose (Pers. Diese ex agar Fruchtkörper Fr.) (BD Grove Difco ): sind var. auch truncata 39 dunkel, g (Schw.) aber Arx sie befinden Distilled/deionised ou les périthèces sich normalerweise de Glomerella water: 1000 nicht glycines ml einem (Hori) dichten, Lehman weißen, Lactic Wolf, flockigen avec acid: les variable Myzel périthèces wie im de Falle D. phaseolorum von D. phaseolorum ou les pyc- und & P. nides phaseoli. de P. Außerdem phaseoli. Ces befinden organes sich de an den fructification Fruchtkörpern sont von également Phomopsis noirs spp. mais keine ils ne dunklen se forment Setae généralement (sterile Haare) pas (Siehe Preparation dans un Punkt mycélium 5). dense, blanc, floconneux comme pour D. phaseolorum et P. phaseoli. Par ailleurs, il n y a pas de 1. septae Weigh noirs out (soies) all ingredients associés aux into organes a suitable de container. fructification 2. Medien de Phomopsis Add 1000 und ml spp. (or (étape Lösungen 500 ml) 5). of distilled/deionised water. 3. Steam to dissolve. 4. Saurer Autoclave Kartoffel-Dextrose-Agar at 121 C, 15 p.s.i. for 15 min. (APDA) 5. Cool to approx. 50 C. 6. (McGee, Adjust 1986, ph to 1991) 4.5 with 85 % lactic acid. It is usually assumed that the lactic acid is sterile, filter sterilise if Kartoffel-Dextrose-Agar contamination is suspected. (BD Difco ): 39 oder 19.5 g 7. Destilliertes/deionisiertes Pour plates (22 ml per Wasser: 90 mm Petri 1000 dish) oder 500 and ml allow Milchsäure: to solidify variabel at room temperature (ca. 22 C) for 24 h before use A partir Effectives Gültig del ab 1 1. de er January janvier enero

5 Règles Reglas Internationale Internationales Internacionales Rules Vorschriften for Seed pour para für les Testing el die Análisis Essais Prüfung de Semences von las Semillas Saatgut Validierte Méthodes Chapter Methoden validées 7: Validated pour zur Gesundheitsprüfung analyse Seed sanitaire Health Testing des von semences Methods Saatgut a b Figure Abb Infizierte Infected Semences Samen, seeds infectées overgrown die mit recouvertes einem by a dichten, dense, d un mycélium weißen, white, floccose flockigen dense, mycelium blanc, Myzel floconneux bedeckt (left) which sind (a) often (a), qui welches contiennent contains oft black, schwarze, souvent globose des ku-fruitgelförmige bodies de (pycnidia) Fruchtkörper fructification and/or (Pyknidien) noirs black globuleux stromatic und/oder (pycnides) bodies schwarze (right). et/ou Stroma-Körper des stroma noirs (rechts) (b). enthält (b). ing éléments a b a b Figure Abb a Micrograph a Mikrofotografie Conidies alpha readily der de häufig Phomopsis produced erzeugten alpha longicolla. Alpha-Konidien conidia 400. of Phomopsis b Dessin von Phomopsis de longicolla, conidies longicolla. 400 beta en (left) forme 400. and b d aiguille Als drawing Zeichnung: de of Phomopsis long lange, needle-like nadelförmige longicolla. beta conidia Beta-Konidien of Phomopsis von Phomopsis longicolla, 1000 longicolla. (right) Gültig A Effectives partir ab del 11. 1January 1 er de janvier enero

6 Validierte Chapter Méthodes 7: Methoden validées Validated pour zur Seed Gesundheitsprüfung analyse Health sanitaire Testing Methods des von semences Saatgut Reglas Internationale Règles Internacionales Internationales Vorschriften International para pour für el les die Análisis Rules Essais Prüfung for de de Seed von las Semences Semillas Saatgut Testing Herstellung Milieux Storage et solutions 1. Potato Prepared Alle Zutaten plates dextrose may in einen be agar stored geeigneten acidifié at room Behälter temperature (APDA) einwiegen. or at 2. 4 C 1000 for up (oder to three 500) ml weeks. destilliertes/deionisiertes Wasser (McGee, hinzufügen. 1986, 1991) 3 Zum Auflösen erhitzen. 4. Potato Sodium Bei dextrose 121 hypochlorite C und agar 15 (BD p.s.i. Difco ) für solution 15 min : 39 autoklavieren. g ou 19,5 g 5. Eau Den distillée/désionisée Agar auf zirka 50 : C 1000 abkühlen. ml ou 500 ml 6. Acide Sodium Den lactique ph-wert hypochlorite : auf variable 4,5 for durch pre-treatment Hinzufügen of seed der can 85-prozentigen from fresh Milchsäure commercial einstellen. bleach Es diluted wird üblicherweise to 1 % avail- be prepareable vorausgesetzt chlorine. The dass concentration die Milchsäure of chlorine sterilisiert in ist; commerciarilfiltrieren, bleach varies wenn considerably eine Kontamination and declines vermutet with storage. wird. ste- Préparation 7. Die Use Platten the formula: (22 ml je 90 mm Petrischale) gießen und 1. vor Peser V stock der = les Verwendung final ingrédients C final /Cbei stock dans Raumtemperatur un récipient (ca. autoclavable 22 C) 24 approprié. h erkalten lassen. (where 2. Ajouter V = 1000 volume ml (ou and 500 C = ml) % available d eau distillée/désionisée. chlorine) to calculate Chauffer the volume pour dissoudre. of commercial bleach stock solution re- 3. Lagerung 4. quired Autoclaver prepare à 121 sodium C et hypochlorite 15 p.s.i. pendant solutions 15 min. for use in 5. seed Laisser pre-treatment. l agar refroidir à environ 50 C Die 6. Ajuster Example: Platten können To ph prepare à bis 4,5 zur avec 1000 Verwendung l acide ml of lactique. a bei solution Raumtemperatuum oder tique hypochlorite 4 est C normalement für bis containing zu 3 Wochen supposé 1 % gelagert chlorine stérile, filtrer werden. from pour a stock stéri- L acide of sodi- lac- of liser commercial si une contamination bleach containing est suspectée. 12 % available 7. chlorine: Verser ml d agar dans des boîtes de Pétri de Natriumhypochloritlösung 90 V stock mm = 1000 et laisser 1/12 solidifier = 83 à température ambiante (22 C) pendant 24 h avant emploi. Die Thus Natriumhypochloritlösung add 83 ml of the 12 % stock für die to 917 Vorbehandlung ml water. der Samen Alternatively, kann aus frischer sodium hypochlorite handelsüblicher solutions Bleich can (Natriumhypochlorit-)lauge, Stockage prepared by using sodium verdünnt dichloroisocyanurate auf 1 % verfügbares tablets Chlor be hergestellt (e.g. Presept, werden. Johnson Die & Chlorkonzentration Johnson Medical Products) in für Industriezwecke Des cording boîtes to the peuvent genutzter manufacturer s être Natriumhypochloritlauge stockées instructions. à 4 C ou à température variiert be- acträchtlich ambiante jusqu à und lässt 3 mit semaines. zunehmender Lagerung nach. Für die Berechnung des Volumens der Bleichlauge-Stammlösung, die für die Herstellung der Natriumhypochloritlösung Solution d hypochlorite zur Samenvorbehandlung de sodium erforderlich ist, ist folgende Formel zu verwenden: VL hypochlorite Stammlsg. = V Endkonz. de sodium C Endkonz. pour /C Stammlsg. le prétraitement de la semence peut être préparé à partir d eau de Javel du commerce Wobei diluée V = Volumen, à 1 % de C chlore. = % verfügbares La concentration Chlor. du chlore dans Beispiel: l eau de Javel Zur Herstellung varie considérablement von 1000 ml et diminue einer Natriumhypochloritlösung stockage. Employer mit la formule 1 % Chlor : aus einer vorrätigen avec le handelsüblichen V stock = V final Natriumhypochloritlauge C final /C stock mit 12 % verfügbarem Chlor: (où V Stammlsg. V = = volume 1000 et 1/12 C = % 83de chlore disponible) pour calculer le volume de la solution commerciale requise pour préparer Folglich des sind solutions 83 ml der d hypochlorite 12-prozentigen de sodium vorrätigen pour Natriumhypochloritlösung dans le prétraitement zu 917 ml de semences. Wasser hinzuzufügen. l utilisation Exemple Alternativ : pour kann préparer die Natriumhypochloritlösung 1 L de solution d hypochlorite durch de Verwendung sodium contenant von Natrium 1 % de Dichloroisocyanurate-Tabletten chlore à partir d eau de Javel commercial (z. B. Presept, contenant Johnson 12 &% Johnson de chlore Medical disponible Products) : entsprechend V stock = der 1 Gebrauchsanweisung 1/12 = 0,083 zubereitet werden. Ajouter ainsi 83 ml de javel à 12 % à 917 ml d eau. Literaturquellen References Par ailleurs, des solutions d hypochlorite de sodium peuvent être préparées en utilisant des tablettes de dichloro- Kulik, isocyanurate M. M. de (1981). sodium ISTA (p. ex. Handbook Presept, Johnson of Seed & Health Johnson, Testing, Skillmann, Working NJ, Etats-Unis) sheet No. selon 27 (2nd les instructions ed.): Soybean du fabricant. pod and stem blight, stem canker, Phomopsis seed decay. International Seed Testing Association, Zurich, Switzerland. Références Kulik, M. M. (1989). ISTA Handbook of Seed Health Testing, Working sheet No. 27 (3rd ed): Soybean Stem Kulik, Canker. M. M. International (1981). ISTA Seed Testing Handbook Association, of Seed Zurich, Health Testing, Switzerland. Working sheet No. 27 (2nd ed.): Soybean McGee, pod and D. C. stem (1986). blight, Prediction stem of canker, Phomopsis Phomopsis seed decay seed decay. by measuring International soybean Seed pod Testing infection. Association, Plant Disease, Zurich, 70, Switzerland Kulik, McGee, M. D. M. C. (1991) (1989). Phomopsis ISTA Handbook Seed Decay. of Seed In: Soybean McGee, Health Testing, diseases: D. C., Working Soybean A Reference sheet diseases: No. Source 27 A (3rd for Reference Seed ed): Soybean Technologists Source Stem for Canker. (ed. Seed D. Technologists, International C. McGee), pp Seed , Testing APS Association, Press, St. Zurich, Paul, Switzerland. Minnesota, USA. McGee, Miles, S. D. R. C. (1963). (1986). Hand Prediction book of of tolerances Phomopsis and seed of decay measures measuring of precision soybean for seed pod infection. testing. Proceedings Plant Disease, of 70, the by International Seed Testing Association, 28 (3), 525 McGee, 686. D. C. (1991) Phomopsis Seed Decay. In: McGee, Roberts, D. C., S. Soybean J., Phelps, diseases: K., Taylor, A J. Reference D. & Ridout, Source M. for S. (1993). Seed Technologists, Design and and interpretation pp APS of seed of Press, health seed St. assays. health Paul, assays. Minnesota, In: Sheppard, In Proceedings USA. J. W., (Ed.) of Proceedings the First ISTA of Plant the First Disease ISTA Miles, Committee Plant S. Disease R. (1963). Symposium Committee Hand book on Seed Symposium of Health tolerances Testing, on Seed and Ottawa, of Health measures Testing, of (ed. precision Ottawa, J. W. Canada. Sheppard), for seed testing. pp. pp , Proceedings Agriculture of the International Canada, Ottawa, Seed Canada. Testing Association, 28 (3), 525 Wallen, 686. V. R. (1964) ISTA Handbook of Seed Health Canada Roberts, Testing, S. Working J., Phelps, sheet K., No. Taylor, 27: J. Soybean D. & Ridout, Stem Canker. M. S. (1993). International Design Seed and interpretation Testing Association, of seed health Zurich, assays. In: Switzerland. Sheppard, J. W., (Ed.) Proceedings of the First ISTA Plant Disease Committee Symposium on Seed Health Testing, Ottawa, Canada. pp Agriculture Validation Validierungsstudien Canada, Ottawa, references Canada. Wallen, V.R. (1964) ISTA Handbook of Seed Health ISTA Testing, (2003). Working Comparative sheet No. evaluation 27: Soybean of Stem the Canker. Botranamended International blotter Seed and Testing acidified Association, potato dextrose Zurich, agar assays Switzerland. for the detection of Phomopsis seed decay in soybean seed. Method Validation Reports. International Seed Testing Association, Bassersdorf, Switzerland. Études de validation ISTA (2003). Comparative evaluation of the Botranamended blotter and acidified potato dextrose agar assays for the detection of Phomopsis seed decay in soybean seed. Method Validation Reports. International Seed Testing Association, Bassersdorf, Switzerland A partir Effectives Gültig del ab 1 1. de er January janvier enero