I Malaysia Sa bah deng'ilo syarat-syarat kegunun scperti beril.-ut:

Transcription

1 UNIVERSITI MALAYSIA SABAH PUMS99:1 '. BORANG PENGESAHAN STATUS I Tjazah: J'AltJ'4N4 MI..!04 ~'N\14 TNDu..!'TlQt SF... <i1 PENGAJlAN: ::l 0 0.: Saya C YNT I+IA Sr-ef' He N (HURUF BESAR) mcngal..-u mcrnbenarkan tesis (LPSlSarjanalDolctor Falsafah) ini.disimpan di Perpustl:L:aan Unl\'c.,rsiti I Malaysia Sa bah deng'ilo syarat-syarat kegunun scperti beril.-ut: It. Tesis ada,lah ha~tik ~civersi~i Mala)"$i.a. Sabah. 2. ~erpustlkaan Unive~iti Malaysia Sabah dibenubn membuat salinan untuk tujuan pengtjian sabaja. 3. Pcrpustakaan dibcnarbn membuat salin.a.n tests ini scbagai bahan pcrtu1c:aran ulan institusi peogajian tinggi. 4. usila tandakan ( / ) o SULrr o TERRA..[) (Mcngwdungi maldumat yang berdaljah kescla.matan atau 1cepcQti~gan Malaysia sepecti yang termaktub di dalun AKTA:RAl;ISlA RASMl t972) (Mengandungi maklumat TERHAD yang tclah ditentukao olch organisasilbad2.n di maca penyclidikan dijalankan) / TIDAK TERHAD Disahkan oleh (TANDA TANGAN PENUUS) AIa.rtUtTctap: Sf<, ga,jil-u H4J"11(A,I SiB"AN&a:N,' 9'1'800' SIf11t.4NJI\-!J,(a RAWAK-=-- (TAN"DATANGAN PUSTAKAWA;-'f) prof. NlAD'rl4 DR. AWANk 110N{) Nama PenyC\ia Tarikh: CAT A T AJ"{: Po tong yang tidalc bcrkcnaan. Jika tcsis ini SULIT atau TERHAD. sila lampirkan sural daripada pihak bcrkuasa/organisui herlc;cnaaro dcngan menyatakan selcali scbab dan tcmpoh Icsis ini pcrlu dilcdaskan 5Cbaglli SULIT dan Tcsis dimaksudlc.an scbagai Icsis bagi Iju..Ih Doktor Falsa!ah dan Sasjana sccara pcnyelidikan. l!tau discrtasi bag; pcngajian SCQr.I1c.etja Ic\lrsus dan pa1yclidilc.an. alau Laporan Projclc SlIjana Muda (LPSM).

2 PENGEKSTRAKAN ASID SITRIK DARIPADA BUAH - BUAHAN TROPIKA NENAS (AllallaS COmllSllS) CYNTHIA STEPHEN TESIS INI DIKEMUKAKAN UNTUK MEMENUHI SEBAHAGIAN DARIPADA SY ARA T MEMPEROLEm IZAJAH SARJANA MUDA SAINS DENGAN KEPUJIAN PROGRAM KlMJA lndustrl SEKOLAH SAINS DAN TEKNOLOGT UNlVERSTTT MALA YSTA SABAH MAC 2004

3 II PENGAKUAN Saya akui karya ini hasil kerja saya sendiri kecuali nukilan dan ringkasan yang setiap satuuya telah dijelaskan sumbemya. 9 Februari 2004 CYNTHIA STEPHEN HS

4 111 DIPERAKUKAN OLEH Tandatangan 1. PENYELIA (prof. Madya Dr. Awang Bono) 3. PEMERIKSAI (Encik Jahimin Bin Asik) --t»-~ 4. PEMERIKSA2 (Encik Collin Joseph) 5. DEKAN (prof. Madya Dr. Amran Ahmed) ct 't. -_.

5 IV PENGHARGAAN Setinggi - tinggi penghargaan diucapkan kepada semua yang terlibat dalam usaha untuk menghasilkan penulisan ini dan ucapan ini ditujukall kbas Prof. Madya Dr. Awang Bono selaku penyelia projek penyelidikan tahun ak.hir dan juga kepada ko - penyelia iaitu Prof. Dr. Duduku Krishnayah yang telah banyak membantu serta memberikan tunjuk ajar dan sokongan sehingga disertasi ini dapat di siapkan dengan sempuma. Ucapan ini juga ditujukan buat kakitangan UMS temtama sekali pembantu makmal dan juga pelajar pascasiswah yang telah memberikan kerjasama dalam mendapatkan bahan kimia dan penggtmaan alat di makmal di SST. Tidak dilupakan juga buat ternan - ternan sepeijuangan yang bersama - sama bertungkus lumus untuk menyiapkan projek ini. Terima kasih kerana sudi menemani dan memberikan kerjasama ketika di saat - saat genting. Segala bantuan serta pertolongan kalian amat - amat saya hargai. Akhir sekali saya tujukan ucapan terima kasih tak terhingga ini kepada individu - individu yang terlibat secara langsung atau tidak langsung dalam penyelidikan ini. Ikhlas Daripada, CYNTHIA STEPHEN HS Mac 2004

6 v ABSTRAK Asid sitrik yang terkandung dalam buab nenas Ananas comusus telah diperolehi. Kaedah pengekstrakan dilakukall ke atas nenas lllentah, separuh masak dan yang bampir lllasak dan ini telah menghasilkan keputusan di antara 4.00% % asid sitrik. Daripada peratusan asid sitrik tersebut didapati nilai asid sitrik semakin menurun apabila ia hampir masak. Asid sitrik yang diperoiehi, dianalisis menggunakan kromatografi cecair berprestasi tinggi (HPLC) menggunakan turus CI8. Komponen asid sitrik ini dapat di tentukan melalui bacaan yang di berikan oleh kromatogram.

7 Vl ABSTRACT Citric acid that content in the pineapple fiuit (Ananas comucus) have been analyzed. Extraction methods are applied on unripe, half-ripening and abnost ripening pineapple and these give the resnlts between 4.00 % % citric acid. From the percentage of citric acid, it was folmd that the value of citric acid decreased when it is almost ripening. The citric acid was analyzed by using high performance liquid chromatography (HPLC) using CI8 column. The citric acid component was detected from the results of chromatogram.

8 vu SENARAlKANDUNGAN Muka Surat PENGAKUAN PENGESAHAN PENGHARGAAN ABSTRAK ABSTRACT SENARAI KANDUNGAN SENARAT JADUAL SENARAI RAJAH SENARAI FOTO SENARAI SINGKA T AN u iii IV V vi vu x Xl xu Xlll BABl PENDAHULUAN 1.1 Asalan Tumbuhan Nanas 1.2 Diskripsi Tumbuhan Nanas l.3 Penanaman Nanas 1.4 Komposisi Buah Nanas 1.5 Kegunaan Buah Nenas 1.6 Objektif Kajian BAB 2 ULASAN PERPUSTAKAAN 2.1 Pengenalan 2.2 Ciri-eiri Dan Sejarah Asid Sitrik 2.3 Sifat-sifat Fizikal Asid Sitrik 2.4 Sifat- sifat Kimia Asid Sitrik. 2.5 Perolehan Asid Sitrik 2.6 Aplikasi Asid Sitrik 2.7 Aspek Ekonomi 2.8 Kaedah Pengekstrakan dan Kromatografi Ceeair Berprestasi Tinggi (HPLC) 2.9 Kromatografi Ceeair Berprestasi Tinggi

9 Vlli Instrumentasi Kaedah dan Penggunaan 22 BAB3 METHODOLOGI Latar Belakang SampeJ Kajian Carta Alir KeIja Makmal Yang Dija1ankan Jenis Peralatan dan Bahan Kimia Kaedah Penyediaan Bahan Kaedah Persampelan Kaedah Pengekstrakall Kaedah Penghab1uran Kaedah Penentuan Menggunakan HPLC Penyediaan Sampel Penentuan Asid Sitrik Dalam Sampel 33 BAB4 KEPUTUSAN Jisim Asid Sitrik Peratusan Hasi1 Asid Sitrik Rumusan Bahan - bahan Dan Jumlah Yang Digunakan Rumusan Hasil Perolehan Keputusan Penentuan Asid Sitrik 37 BAB5 PERBINCANGAN Hasil Pengekstrakan Kaedah Digunakan Bagi Menentukan Asid Sitrik Analisis Keputusan Asid Sitrik 44 BAB6 KESIMPULAN Kesimpulan Cadangan Kajian 46

10 IX RUJUKAN LAMPIRAN 47 49

11 x SENARAI JADUAL No. Jadual Muka Surat 2.1 Ciri -ciri fizikal asid sitrik. 2.2 Ketelarutan asid sitrik., anhidrous. 2.3 Graviti Spesifik larutan asid. 3.1 Jadual menunjukkan jenis - jenis peralatan yang digunakan semasa kajian dijalankan. 3.2 Jadual menunjukkan jenis - jenis bahan kimia yang digunakan semasa kajian dijalankan. 3.3 Pencirian sampeljus nenas. 3.4 Keperluan bagi menentukan penentuan asid sitrik dalam sampel 1, 2, Keputusan jisim asid sitrik 4.2 Keputusan peratusan asid sitrik 4.3 Jumlah bahan - bahan danjumlab yang digunakan semasa menjalani pengekstrakan 4.4 Rumusan basil peratusan asid sitrik yang diperolebi

12 Xl SENARAI RAJAH No. Rajah Muka Surat 2.1 Fonnula StruktUT bagi asid sitrik Tindakbalas pengesteran asid silrik dengan menggunakan mangkin Tindakbalas ketidakkomposisian terma asid sitrik (1) kepada asid akonitik (2), asid sitronik (4) dan pengoksidaan kepada asid asetondikarbosilik Tindakbalas pengoksidaan asid sitrik Penghidrogenan trisodium sitrat terhadap mangkin Ni pada 8.6 Pa (85 atm) dan suhu pada 220 e Rajah kitaran Kreb Ringkasan kaedah k~iian Ringkasan gerak keija an ali sa sampel Grafpenentuan kehadiran asid sitrik dalam sampell Grafpenentuan kehadiran asid sitrik dalam sampel Grafpenentuan kehadiran asid sitrik dalam sarnpe13 40

13 XlI SENARAI FOTO No. Foto Muka Surat 1.1 Nenas Anana.~ Comusus 2.1 Alat turus kromatografijenis CI8 2.2 Alat analisis kromatografi. cecair berprestasi tinggi (HPLC) 3.1 Alat mesin pengisar 3.2 Sampeljus nenas 3.3 Penurasan 3.4 Asid sitrik dalam bentuk cecair 3.5 Dry oven 3.6 Hot Plate dan Water Bath 3.7 Pam vakum

14 XllI SENARAI SINGKA TAN % Peratus & Dan Bersamaan dengan > Lebih daripada ± Lebih kurang DC OF atm g mg L ml JlL psi Pa T t t m em mm run Jlm Darjah Celcius Darjah Farenheit Tekanan atmosfera Gram Miligram Liter MiliLiter MikroLiter pound per inci persegi Pascal Suhu Masa Tan Meter Sentimeter Milimeter Nanometer Mikrometer

15 BABI PENGENALAN 1.1 Asalan Tumbuban Nanas Nanas adalah datang dari famili Bromeliaceace dan dari order Bromeliales. Nanas terkenal dengan diklasifikasikan sebagai Ananas comosus. Nanas primitif, yang membiak secara banyak di Andes telah di klasifikasikan dalam genus Puya. Famili nanas mengandlmgi lebib daripada 2000 spesis dengan 46 genera adalah berasal dari kawasan tropika dan subtropika Amerika, dengan satu spesisnya di Barat Afrika. Banyak spesis nanas telah ditanam di merata - rata tempat di dunia masakini. Mengikut sejarah, buah nanas berkemlmgkinan mula - mula didomestikkan di tengah Amerika Selatan; ia adalah ditanam secara meluas untuk seratnya, sebelum orang Eropah mula menjumpainya di Caribbean. Selepas itu, penanaman diperluaskan kepada selumh kawasan beriklim panas di selumh dunia. Hawai menghasilkan hampir sahl pertiga daripada hasil tanaman di dunia dan membekalkan 60 peratus produk nanas dalam tin. Antara negara lain yang turut mengepalai pengeluaran adalah China, Brazil dan Mexico yang mana juga mempunyai keadaan ik.lim dan cuaca yang bersesuaian dengan penanaman nenas ini.

16 2 BagaimanaplID di Malaysia juga nanas ditanam secara meluas seperti di Johor, Selangor, Pulau Pinang dan di Sarawak kerana kesesuaian tanab dan ildimnya. 1.1 Diskripsi Tumbuhan Nanas Buah nenas Ananas com usus mempakan di antara salah satu buah yang berbau wangi dengan mepunyai rasa tersendiri. la merupakan buab berbentuk bujur dan bersaiz kira - kira 12 inci par,jang dan bercirikan dengan kulit yang keras dan bersisik. Ia membesar setinggi cm. Gugusan daunnya panjang, lurus serta runcing mencapai sehiugga loo em panjangnya dan tersusun secara roset tertumpu dari bahagian pus at tangkai. Tumbuhan ini mengandungi bunga yang tersusun dalam kelompok lingkaran yang padat. Bunganya adalah lengkap dengan pelepah, 3 kelopak daun yang pendek bersama kelopak bunganya, 6 stamen, dan ovan yang terkedalam dengan 3 lokul. Pada PlIDCak buahnya termampat berisi dedatm yang berbentuk seperti mahkota sebagaimana di~jukkan dalam Foto 1.1 (Lampiran A) Bahagian buah yang boleh di makan adalah bahagian serat yang berjus dan berwarna kuning, yang mana kebiasaannya dipotong kepada kepingan ataupun berbentuk kiub. lanya paling sesuai dimakan sewaktu manis dan keasidan yang sederbana; yang mana ianya mungkin mengandungi antara peratusan gula dan peratusan keasidan tertitrat. (Bartholomew el ai., 2002).

17 3 1.3 Penanaman Nanas Nanas adalah tumbuhan yang sentiasa ada tanpa mengikut musim dan akan mati setelah penuaian buah. 1a memerlukan iklim yang panas dan lembap secukupnya untuk pertumbuhan dan sebingga kini nanas adalah buah yang berkadaran dengan sllhu tropik yang panas. Ia sesuai ditanam pad a aras di bawah 840m (2800 kaki) dengan suhu tahunan pada had antara IS.5 C - 26 C (65-7C)O F). Kualiti bllah yang baik adalah disebabkan oleh kawasan penanaman yang mempunyai kombinasi suhu malam dingin yang relatif, peratusan cahaya matahari yang tinggi dan suhu siang yang berkadaran antara 21 C C (70-85 F), dan tidak melebihi 32 C (90 F). Nanas adalah tanaman jenis xerophytic di mana ia agak tahan kepada keadaan kemarau. Ia boleh bidup dalam taburan hujan tahunan antara mm. Nanas boleh ditanam pada kebanyakkan jenis tanah daripada tanah alluvium ke asid sulfat dan tanah gambut dengan saliran yang baik (Tanaman Buah - Buahan, 2002). 1.4 Komposisi Buah Nanas Bagi setiap 100g, nanas di katakan mengandungi kalori, g air, 0.4- O.7g protein, 0.2--Q.3g lemak, g karbohidrat, 0.4--Q.5g serat, O.3--Q.4g ash, 17-1Smg kalsium, 8-12mg fosfat, O.5mg ferum, I- 2mg natrium, mg K, 32-42mg b-karotin, O.06--Q.08mg thiamina, Q.04mg riboflavin, 0.2--Q.3mg niacin, dan (-96)mg asid askorbik.

18 4 Nanas juga mengandtmgi 1-5 % asid sitronik (sebingga 8.6%), kalsium 3.5% manakala gula, 7.5% sukrosa, mencapai 15% pada peringkat kematangan. Di dapati juga bahawa terdapat vanillin, metilin - propil keton, asid n - valerianik, asid isokapronlk, asid acrylik, asid L(-)-malik, asid b - metilthiopropionik metl1 ester (dan etil ester), 5 -bidroksitriptamina, asid kuinik 1,4-di-p-koumarin. 1.5 Kegunaan Buah Nanas Nanas adalah ditanam untuk buabnya; diguna secara segar, ditinkan, disejukkan atauptm dijadikan dalam bentuk jus perahan, sirap atau gula - gula. Kisaran nanas selepas daripada perahan jus, adalall mempunyai kandungan vitamin A yang dan digunakan sebagai makallan haiwan temakan. Daripada jus nanas asid sitrik boleh di esktrak atau semasa penapaian. Secara kormesil "bromelain" di sediakan daripada sisa - sisa nanas yang telah digtmakan. Campuran daripada sedikit "proteases", "bromelain" digunakan dalam melembutkan daging, menghalang pembekuan bir, pengilangan cereal setengah masak, dalam sesetengah kosmetik dan dalam penyediaan penyembuhan bahagian yang terbakar. Jus nan as daripada buah yang belum matang bertindak sebagai bahan pencuci yang kuat, dan juga anthelmintic dan ecbolic. Nanas yang telah masak adalah diuretik; baik untuk sistem perkumuhan, tetapi dalam kuantiti yang banyak ia boleh mengakibatkan jangkitan rahim. Air rebusan daun di minum lmtuk penyakit venemes; penyakit jangkitan kelamin. Jus daripada daun tersebut digunakan untuk batuk - batuk, pembasmi cacing dan pencuci bahagian pentt.

19 5 Buah yang telah masak digunakan sebagai antiskorbutik, kolagogik, diaphoretik, penyejukkan, dan amat diperlukan untuk penyakit kuning. Kesan sampingan yang bahaya terhadap pengambilan dos terapeutik ini adalah seperti rasa loya, muntah - muntah, cirit - bint, kulit kering dan menorrhagaia. Jika ianya masih mentah, nanas bukan sahaja tidak boleh dimakan malahan ianya dianggap beracun; menyebabkan gatal di bahagian kerongkong dan bertindak sebagai pencuci dalam perut yang drastik. Pengambilan bahagian empulur nanas yang berlebihan boleh mengakibatkan pembentukkan bebola fiber (bezoars) dalam organ perkumuhan. Jus nanas, yang mengandtmgi asid sitrik, mempunyai rasa yang berbeza setelah ia menjadi semakin matang dan masak. Nanas yang masih muda mempunyai rasa yang lebih masam berbanding den gall buah yang telah masak. Buah nanas yang telah masak mempunyai rasa yang manis dan pada ketika yang sarna rasa masamnya semakin berkurangan. Produk jus nanas boleb didapati secara kormesil dengan memproses buah nanas yang telah matang serta masak dengan sempurna di mana ianya mempunyai rasa dan wama yang tersendiri. 1.6 Objektif Kajian Projek Objektifkajiall thesis ini dualankan adalah: Mengekstrak asid sitrik daripada jus buah nanas dan melakukan penghabluran ke atas asid sitrik Untuk menentukan keasidan buah nanas dengan meggunakan analisis HPLC

20 BAB2 ULASANPERPUSTAKAAN 2.1 Pengena]an Ulasan perpustakaan yang dibuat oleh saya untllk adalah mengenai asid sitrik yang disediakan melalui kaedah pengekstrakan daripada buah nenas Ananas comusus. 1a melibatkan beberapa rujukan iaitu daripada jurnal - jurnal, ensiklopedia, buku - buku, majalah pendidikan, risalah dan sumber internet. 2.2 Ciri - Ciri Dan Sejarab Asid Sitrik Asid sitrik (asid 2-hidroksi-l,2,3-propanetricarboxylic), adalah komponen sernulajadi and metabolisma llmum dari tumbuhan dan juga haiwan. lanya adalah merupakan asid organik yang paling versatil serta di gtmakan secara meluas dan memainkan peranan penting dalam makanan, minuman dan hasilan industri fannasi.

21 7 CH2 - COOH I HO - C - COOH I CH2-COOH (Dictionary of Natural Product, 1994), Rajah 2.1 Formula struktur bagi asid sitrik Sebagai asid yang selamat dan boleh di makan, asid sitrik di gunakan secara meluas kerana kurang keasidan, kekuatan pengke]atan dan mempunyai rasa yang sedap, ianya di aplikasikan Lmtuk perasa makanan, pengawet (seperti didalam minuman dan gula - gula) dan juga sebagai antioksida. Asid sitrik mengbasilkan kesan buihan bila asid karbonat di hasilkan. Kebanyakan ubatall juga disediakan menggunakannya. Contobnya seperti Piperazine citras (sebagai "anthelmintic"), Ferri Ammonni citas ( tonik "hematic") dan natri citras ( sebagai anti beku dalam peroindaban darah ). Dalam kimia industri, trietil acetocitrat dan tributil acetocitrat boleh di gunakan sebagai pemplastikan bukan toksik lmtuk menghasilkan filem plastik. Untuk mematuhi kehendak perlindungan alam sekitar, sebagai ramuan detergen, asid sitrik semakin kerap digunakan secara meluas Ulltuk mellggantikan sodium tripolifosfat, yang mana boleh mencemarkan alam sekitaran (Encyclopedia of Chemical Technology 1993). Asid sitrik adalab kandungan utama dalam buah - buahan dan ia boleh disediakan dari lemon dan juga limau. Tetapi, pada hari ini cara penyediaan asid sitrik

22 8 kormesil yang paling biasa digtmakan adalab proses penapaian yang menggunakan fungus Asperf?illus nif?er atau Asperf?illus ventii. Proses penghibridan dan pemilihan menghasilkan jenis mutan iaitu basil yang berlainan daripada asalannya yang boleb menukarkan sehingga 80 peratus atau lebih sumber gula kepada asid sitrik. Walaupun industri merahsiakan maklumat sebenar bagaimana proses perindustrian penapaian dijalankan, eksperimen memmjukkan bagaimana proses penapaian ini dilakukan serta bagaimana ia menghasilkan asid sitrik. (MacMillan Encyclopedia of Chemistry, 1997). Dari segi sejarah, 1ebih kurang abad ke 12, seorang ahli kimia Vincentius Bellovacensis mengenalpasti babawa jus lemon dan limau mengandungi s~jenis asid. Dalam tallun 1784, Scheele merupakan orang pertama yang mengasingkan asid sitrik secara pengkristalan darijus lemon (Encyclopedia of Chemical Technology, 1993). 2.3 Sifat - sifat Fizikal Asid Sitrik Asid sitrik, anhydrous, dikristalkan dari larutan akues mejadi ben1uk hablur yang tak berwarna dan lut cabaya atau serbuk putih seperti kristal. Hablur yang terbentuk adalah monoklinik holohedra. Asid sitrik bersifat melembapcair dalam udara yang lembap. Sedikit sifat fizikal adalah di nmjukkan dalam jadual 2.1. Keterlarutan asid sitrik dalam air dan sesetengah pelarut organik diberikan dalam jadual 2.2. ph dan graviti spesifik lamtan akues asid sitrik dittmjukkan dalamjadual 2.3. Larutan akues asid sitrik menjadikan sistem penimbal yang baik bila separa temeutral kerana asid sitrik adalah asid yang lemah dan mempunyai tiga kumpu1an

23 9 karbonil, maka terdapat tiga pka's. Pada 20 0 e pkl =3.14, pk2 =4.77, dan pk3 =6.39. kadar penimballmtuk larutan sitrat adalah ph 2.5 hingga 6.5. Sistem penimbal boleh dilakukan dengan menggunakan larutan asid sitrik dan dan sodium sitrat atau dengan peneutralan larutan asid sitrik dengan bahan asas seperti sodium hidroksida. Asid sitrik monohidrat mempuyai berat molekul dan dhablurkan dari larutan akues sejuk. Bila dipanaskan secara periahan, hablur akan kehilangan air disebabkan hidrasi pada e dan akan cair pada had C. Pemanasan seeara eepat menyebabkan dehidrasi pada loooe untuk membentuk hablur yang eair tepat - tepat pada 153 e. Asid sitrik monohidrat adalah terdapat dalam kuantiti komersil yang terhad kerana kebanyakan aplikasi masakini adalah dalam bentuk anhidrous. Jadual 2.1 eiri - eiri fizikal asid sitrik. Ciri - eiri (Asid Sitrik Sebagai Anhidrous) Nilai Formula molekul C6Hs0 7 Mol wt Berat dalam gram Takat didih ]53 SOOu dekomposisi tenna DC ]75 KeLlUllpalan, glml Haba pembakaran, n MJ/molt> 1.96 Haba larutan, JIg) 117

24 10 Jadual 2.2 Keterlamtan a asid sitrik, anhidrous. Suhu, OC Dalam air g/100g 1rtn piawai (Encyclopedia of Chemical Technology,1993) Jadual 2.3 Graviti Spesifik Lamtan Akues Asid Sitrik. Kepekatan %w/w ph l.7 l Graviti spesifik pada 25 C l.035 l.084 l (Encyclopedia of Chemical Technology,1993)

25 47 RUJUKAN Bartholomeow, D.P.,Rochrbbach, K.G. dan Evans, D.O., Pineapple Cultivation in Hawatt,College of Tropical Agriciltural and Human Resource, Hawaii. Dictionary o.fnatural Product, Volume 1, Chapman & Hall, London. Encyclopedia ~f Chemical Technology, Volume 6. Ed. ke-4. A Wiley - Interscience Publication, Canada. Hulme, AC., 197 J. The Biochemistry of Fruits And Their Products, Vol.2. Academic Press, London Lehman,.T. W., 1999, Operalional Organic Chemislry (A prohlem Solving Approach 10 the Laboratory Course), Ed. ke-3, Prentice Hall, United States of America. MacMillan h'ncyclopedia ~f MacMillan, New York. Chemistry, Volume I, Simon & Schuster Panel Penulis PCT, 2002, Tanaman Buah - Buahan. Penerbitan PCT Sdn. Bhd., Kuala Lumpur Pavia, D.L., Lampman, G.M., Kriz, G.S. dan Engel, RG., Introduclion To Organic l,ahoralory Techniques: A Microscale Approach, Ed. ke-2, Saunders College Pulishing, United State of America. Pall eros, D.R, 2000, Experimental OrRanic Chemistry, John Wiley & Son INC, New York

26 48 Sue Azam Ali, Production of Pineapple Juice. ITDG. Intennediate Technology Development Group. U.S Department of Agriculture, United Standards./or Grades ql Concentrated Pineapple Juice, United States of America. Wilcox, C.F Jr. and Wilcox, M.F., Experimental Organic ChemistlY (A Small Scale Approach), Ed. ke-2, Prentice Hall, New Jersey.