تهيه و کنترل کيفيت محيط های کشت

Transcription

1 11 1 تهيه و کنترل کيفيت محيط های کشت نکات عمومی در مورد محيط های کشت: آب: کیفیت محیط های کشت بطور مستقیم بستگی به کیفیهت مهوخا هار مهورا خههتفااه ار نهیه ردهها اخرا رب یکهی خ مهمترین موخای خهت ک ار نهی محیط های کشت بکار میروا ه معیار مههم بهرخی رب مهورا خههتفااه ار نهیه محیط های كشت شامل وجوا یودهای مس قدرت هدخیت خلکتریکی و ph مهی باشهد ار شهرخیط خیهده ری یودههای مس بدلیل اصیت مهارکنندگی برخی خغلب میکروخرگادیسم ها دباید ار رب مورا خهتفااه جههت نهیه محهیط ههای کشت وجهوا اخشهت باشهد قهدرت ههدخیت خلکتریکهی رب بایهد کمتهر خ 51 میکهرو یمهنس باشهد وهمچنهینpH رب مورا خهتفااه بهتر خهت کمی خهیدی باشد ولی دباید کمتر خ 1/1 باشد توزين محيط کشت و افزودن آب: طبق اهتورخلعمل نهی محیط کشت ک بر روي قوطي دصب گرایده خهت مقدخر مناهبي خ پوار محیط کشت رخ با اقت و ن دمایید ظرف محیط کشت رخ اور خ کورخن هوخ و رطوبت با کنید خ خهتنشاق پوارها ب صوص ردهایي ک اخرخي موخا همي هستند و نماس طوالدي مدت ردها با پوهت خجتناب کنید پوار رخ ب هرعت ب اقت و بدون خیجاا نواه خي خ غبار و ن کنید هرچ وانر ارب ظرف رخ ببندید دصف حجم رب مورا دیا رخ اخ ل ظرف بریزید هپس مقدخر و ن شده محیط کشت رخ ب رن خضاف دمایید برخي چند اقیق ب نندي نکان اهید باقیمادده رب رخ ب ایوخره ظرف بریزید نا ذرخت محیط کشت چسبیده ب ایوخره دیز وخرا محلوی شودد خین مرحل بسیار مهم خهت چون پوار شک محیط کشت ار باالي هطح رب ممکن خهت ار خنوکالو خهتریل دشوا و منبع رلواگي گراا حل کردن محيط کشت: هاي کشت محیط بدون رگار معموال با نکان اخان رهست و مالیم حل وخهند شد خما محیط هاي کشت حاوي رگار باید قبل خ حرخرت اخان ب مدت چند اقیق با رب مخلوط شودد هپس حرخرت اخاه شودد نا رگار قبل خ خنوکالو کران حل شوا محیط هاي کشت رخ بجوشادید بدون ردک بسو دد محیط هاي کشتي ک دباید خنوکالو شودد بعد خ خین مقدخر حرخرت اخان برخي نقسیم اخ ل پلیت ها یا ظروف ایگر رمااه وخهند بوا خکثر محیط هاي کشت ب خهتریلیزخهیون دهایي )ار اماي مدت 51 اقیق ) دیا وخهند اخشت 525 ب C 1

2 11 2 اندازه گيري و تنظيم :ph محیط هاي کشت اهیدرخن خگر بطور مناهب نهی شودد دیا ي ب ننظیم ph ددخردد ph دهایي محصوی خهتریل شده رخ مي نوخن روي پلیت یا بطري خددخ ه گیري کرا خما باید ردها رخ بعد خ هنجش ph اور ریخت بنابرخین بعد خ خهتریل مورا دظر )0/2 شوا شدن و نک شدن محیط کشت نا اماي ph 21 مقدخر C ننظیم دمایید ننظیم ±( ph معموال با خهتفااه خ هیدروکسید 00 هدیم رخ ار حد گرر ار لیتر )نقریبا" یک موالر( و یا با خهتفااه خ خهید کلریدریک 63/1 گرر ار لیتر )نقریبا" یک موالر( خدجار مي توزيع: 6 محیط کشت رخ ار ظرفي مناهب با حجم 2 نا برخبر حجم محیط کشت بریزید نا بتوخدید ردرخ ب وبي نکان اهید و مخلوط کنید استريليزاسيون: بعضي خ محیط هاي کشت ب خهتریلیزخهیون با خنوکالو خحتیاجي ددخشت و با جوشاددن خهتریل مي شودد ک اهتور ها ت ردها بر روي برچسب قوطي محیط کشت قید گرایده خهت خهتریلیزخهیون هایر محیط هاي کشت نوهط حرخرت مرطوب یا صافي غشایي خدجار مي گراا ک خین موخرا دیز بر روي بر چسب قوطي محیط کشت قید گرایده خهت خلف( خهتریلیزخهیون با حرخرت مرطوب: خهتریلیزخهیون محیط کشت نا حجم یک لیتر ار خنوکالو ب 51 مدت اقیق و ار اماي C 525 )فشار 5/2 کیلوگرر بر هادتیمترمربع( خدجار مي گیرا برخي حجم هاي بیشتر خ یک لیتر باید چر خهتریلیزخهیون رخ بطور مناهب نغییر اخا خما چون خکثر مشکالت ار خهتریلیزخهیون محیط هاي کشت وقتي رخ میدهد ک مقاایر بیشتر خ او لیتر محیط کشت باید خهتریل شوا لذخ نوصی مي شوا ک مقاایر یاا محیط کشت رخ ار حجم هاي کوچکتر نقسیم دمایید کنترلی کیفی خنوکالو کنتری اما و فشار خنوکالو بایستی بطور مدخور خدجار گراا خددیکانورهای شیمیائی خهتفااه می کنند TST خ خددیکانورهای بیولوژیکی ک برخی کنتری خنوکالو خ جهت کنتری کارخئی خنوکالو خهتفااه می کنند خهپور Bacillus Stearothermophilus رخ می نوخن دار برا ک بصورت نجاری قابل اهترس می باشد 2

3 11 3 ب( خهتریلیزخهیون با صافي غشایي: شوا خ صافي غشایي برخي خهتریل کران محیط هاي کشت و نرکیبات حساس ب حرخرت خهتفااه مي خهتریلیزخهیون بوهیل صافي غشایي نحت شرخیط الء یا خفزخیش فشار خدجار مي پذیرا خ غشاء ها و صافیهاي با قطر منفذ 0/01 یا 0/22 میکرومتر خهتفااه دمایید خین فیلترها باید قبل خ خهتفااه ار خنوکالو خهتریل شودد ار مورا غشاء ها و صافیهایي ک ار بست بندیهاي خهتریل ب فروش مي رهند ب اهتورخلعمل ها دده مرخجع دمایید قسمت هاي مختلف اهتگاه صافي رخ با صافي یا بدون صافي ار خنوکالو ب مدت 51 اقیق ار اماي C 525 خهتریل دمایید آماده سازي جهت مصرف: بعد خ خهتریلیزخهیون خجا ه اهید اماي محیط کشت ب حدوا 10 برهد C رهپتیک ار ظروف دهایي نقسیم دمایید هیچ وقت محیط کشت رخ ار اماي باالنر خ هپس با رعایت شرخیط 10 نقسیم دکنید C مکمل هاي حساس ب گرما و حرخرت باید بعد خ خین ک اماي محیط کشت ب حدوا C خضاف شودد خجا ه اهید اماي مکمل )هاپلمنت( خهتریل قبل خ 10 رهید ب رن خین ک ب محیط کشت خضاف شوا ب اماي خناق برهد هپس مکمل رخ با رعایت شرخیط رهپتیک ب محیط کشت خضاف دمواه وب مخلوط کنید و ار ظروف دهایي ک خ قبل خهتریل شده خدد نقسیم دمایید پتری ديش: معموال پتری ایش ها رخ رخ بها خنهیلن خکسهاید کیفیت پتری ایش های مورا خهتفااه ار نهی محیط دیز خهمیت اخرا ار صهورت خههتفااه خ پتهری ایهش ههایی که بها خنهیلن خکسهاید خههتریل شهده باشهند ویا خشع گاما خهتریل می کنند دظههر وجههوا بقایههاي خیههن مههااه بررهههی شههوا یههرخ خنههیلن خکسههاید اخرخی اصههیت مهههار کننههدگی بههرخی بایسههتی خ ار صهورت خههتفااه خ میکروخرگادیسهم هها مهی باشهد و مهی نهوخن رن رخ بها روش کرومهانوگرخفی خدهدخ ه گرفهت خههتفااه خ پتهری ایهش پتری ایش های شیش خی بایستی خ پتری ایش هایي خ جنس بروهیلیکات خههتفااه کهرا هایي خ جنس قلیائی ممکن خهت موجب ر خا ها ی قلیا ار اخ ل محیط کشت گراا پارامترهای فيزيکی: محیط کشت های نهی شده باید قبل خ خهتفااه خ لحاظ فیزیکی و ظاهری دیز بررهی شودد معیارهای ظاهری قابل بررهی شامل وجهوا حبهاب حفهره داصهافی ههطح محهیط نهری هوراگی یه اگهی مهی باشهد ضهخامت محیط دیز خهمیت اخرا ضخامت محیط های کشت پلیتی دباید كمتر خ 6 میلی متر باشد 3

4 11 4 نگهداری محيط های کشت تهيه شده: طوی عمر محیط های کشت نهی شده بستگی ب دوع خجزخء نشکیل اهنده محیط دحوه دگههدخری و ذ یهره کهران ردهها اخرا نمهامی محهیط ههای کشهت بایهد اور خ دهور دگههدخری شهودد نهابش دهور به محهیط ههای کشهت موجهب نشکیل موخا باکتریوهتانیک و باکتریساید مادند پرخکسیدخ می گراا طوی عمر خغلب محیط های کشت پلیتهي ار امای 0 ارج هادتیگرخا یک هفت می باشد ولی خگر ار اخ ل کیس ههای پالههتیکی بسهت بنهدی شهودد بطوریکه هوخ اخ ل ردها دفوذ دکنهد نها 6-0 هفته قابهل مصهرف هسهتند طهوی عمهر محهیط ههای کشهت حهاوی ردتهی بیونیهک بستگی ب پایدخری ردتی بیونیک موجوا ار رن اخرا ار مجموع محیط های حاوی ردتی بیونیک رخ ار مهدت یهک هفت باید مصرف کرا خ هوی ایگر با گذشت مان خینگود محیط های کشهت رطوبهت هوا رخ خ اههت اخاه بدلیل خفزخیش غلظت ردتی بیونیک قدرت خدتخابی ردها خفزخیش می یابد پلیت ها رخ بایهد قبهل خ مصهرف به امهای خناق رهادد خگر پلیت محیط کشت بیش خ 8 هاعت ار امای خناق باقی بمادهد بهرخی مصهرف مناههب دمهی باشهد محیط های کشت لول خي ار مقایس با محیط های کشت پلیتی عمر طهوالدی نهري اخردهد خغلهب خیهن محهیط ههای کشت خگر ار امای 0 ارج هادتیگرخا دگهدخری شودد 6-3 ماه قابل مصرف می باشند موارد استثناء: نایوگلیكوالت برخث خددوی دیترخت برخث و SIM فقهط به مهدت یكمهاه قابهل دگههدخري مهي باشهند محیط هاي CTA Medium و OF Medium حاوي كربوهیدرخت و مولرهینتون برخث فقط ب مهدت 3 هفته قابل دگهدخري مي باشند 4

5 11 5 اشکال درر بوان رگار ph دامناهب ردگ یا نیرگي غیرطبیعي همیت رشهد ضهعیف خرگادیسهم یها اخشهتن اصهههیت ضهههعیف خدتخهههابی و یههها خفترخقی لخت یا كوخگول شدن محیط كشت رگ رگ شدن محیط كشت خیجاا رهوب یا كدورت جدول 1- علل اشکاالت راي در محيط های کشت علت حرخرت بیش خ حد ph پایین ک موجب هیدرولیز خهید ار محهیط كشهت مهی گهراا نهو ین یها مخلهوط دکهران ارههت حهل دشهدن كامهل رگهار حجهم داارههت رب رقیهق ها ي یاا با مایع نلقیح یا مكمل ها و ذ یره ها ي طوالدي ار اماي 10 ºC خههتفااه خ شیشه ههای قلیهائی رب دا هال حهرخرت بهیش خ حهد رلهواگی شهیمیائی خدههدخ ه گیههری ph ار امههاي دامناهههب خهههتفااه خ ph متههر غیرکههالیبره خهههتفااه خ پوارههای محهیط کشهت هرخب شهده ذ یهره هها ي داارههت محهیط كشهت اهیدرخنه و كیفیت پایین رب یا ظروف دا هال بهوان رب خههتفااه خ شیشه رالت کثیهف خههتفااه خ پوارههای محهیط کشهت رخب شده حرخرت اخان بیش خ حد ph دامناهب حل دشدن كامهل محهیط كشهت و ذ یره ها ي طوالدي ار اماي 10 ºC حرخرت اخان بیش خ حد )هو خددن محیط( خهتفااه خ پوارهای محهیط کشهت هرخب شده قرخرگیري ار معرض مستقیم دور ورشید و حجم داارهت مكمل خضاف شده خهتفااه خ رب و یا شیشه رالت رلهواه خههتفااه خ پوارههای محهیط کشهت هرخب شهده نو ین یا مخلوط دکران ارههت حهرخرت بهیش خ حهد ذ یهره هها ي طهوالدي محهیط كشت شك شدن نیرگي ونغییر ph محیط كشت حرخرت بیش خ حد محیط ار هنگار خفزوان مكمل ب رن رگ رگ هیاه: دیم هو شدن رگار رگ رگ روشن: هرا شدن رگار موقع خفزوان مكمل ph دامناهههب دا ههال بههوان رب خهههتفااه خ شیشهه رالت کثیههف حههل دشههدن محههیط كشت كیفیت پایین رب یها ظهروف حهرخرت بهیش خ حهد و ذ یهره هها ي طهوالدي ار اماي 10 ºC 5

6 11 6 کنترل کيفی محيط های کشت ميکروبی: خصطالحات مربوط ب هوی های میکروبی کنتری - ههوی کنتهری Strain( :)Control میکروخرگادیسهمی که بهرخی خر یهابی عملکهرا میکروبهی محهیط کشهت خهتفااه می شوا - هوی مرجع Strain( :)Reference میکروخرگادیسمی ک حدخقل نا هطح جنس و گوده شناههایی شهده و بر خهاس ویژگی ها و نرجیحا منشا رن فهرهت بندی و نعریف شده خهت - ذ یره های مرجع Stocks( :)Reference کشت های بدهت رمده خ پاهاژ هوی مرجعی ک خ مرخکز بین خلمللی نهی شده خهت - ذ یهره ههای کهاری Stocks( )Working : کشهت مجهدای که خ کشهت ههای ذ یهره جههت کنتهری کیفیهت محیط های کشت خهتفااه می شوا منبع سويه های کنترل: هم هوی های کنتری ک ار جدوی 2 خ ردها دار براه شده خهت ATCC می باشند collection).(american type culture خین هوشها حدخقل هوشهایی هستند که بایهد بهرخی خر یهابی ههر محههیط کشههت خهههتفااه شههودد خرگادیسههم هههای مهورا خهههتفااه بههرخی خههدخف کنتههری کیفهی مههي نوخدههد خ هههوی هههای National collection باشد ه و ی ه ا ی ا ی گ ر ی د ی ز م م ک ن خ ه ه ت ن و ه ه ط ه ه ا د د ه م ح ه ی ط ک ش ه ت ب ه ک ه ا ر ر و ا ک ه شامل مجموع خی خ هوی های وحشی strain( )Wild یا بدهت رمده خ دمود های بیمار می باشد ک مخت هر ر مایشگاه بواه و برخی خدجار ر مایش هاي بیشتر ب کار می رودد روش انجام آزمون کنترل کيفيت محيط های کشت تهيه سوسپانسيون ميکروبی: یک کشت خ خرگادیسم کنتری کیفی روی پلیت بالارگار نهی کنید بعد خ خدکوباههیون پلیهت 6-1 کلنهی خیزوله رخ ار مقدخر کمی نریپتیکیس هوی برخث (TSB) خهتریل حل دمایید نا هوهپادسیون میکروبی حاصل شوا و رن رخ برخی چهار یا پنج هاعت خدکوب دمایید هپس کدورت رن رخ با خهتاددخرا دهیم مهک فارلنهد ننظهیم کنیهد )خههتاددخرا دیم مک فارلند ار طوی موج 625 nm اخرخی جذب 0/08 نا 0/5 دانومتر می باشد( ب جای خین روش می نوخن مستقیما خ کلنی های خیزول روي پلیهت هوهپادسهیون میکروبهی مطهابق بها كهدورت دیم مهك فارلنهد نهیه كهرا بهدین نرنیهب كه 6-1 کلنهی خیزوله روی پلیهت 20 ههاعت رخ ار 6-1 میلهی لیتهر ههرر فیزیولوژی خهتریل حل كراه و کدورت رن رخ با دیم مک فارلند ننظیم دمایید با هر روشهی که خیهن هوهپادسهیون 6

7 11 7 میكروبي نهی شوا باید كدورني حاوی CFU/ml کلنی اخشهت باشهد )مطهابق بها خههتاددخرا دهیم مهک فارلند( -5 بررسی آزمايش هاي عملکردی محيط کشت testing( )Performance آزمايش ظرفيت مغذی بودن activity( )Nutritional محيط هاي کشت پليتی مادند بالا رگار هوهپادسیون خولی رخ ب دسبت 1 به 111 ار درمای هالین یا رب مقطر خهتریل رقیق دمواه و مقهدخر 50 µl یها 0/05 ml هوهپادسیون رقیق شده رخ ب محیط کشت مورا ر مایش نلقیح كنید هر پلیت )CFU/plate( می باشد خدتخابی ممکن خهت دیا باشد ک هوهپادسیون رخ اه بار رقیق نر نهی نعدخا کلنی های مورا خدتظهار ار برخی خجتناب خ رشد یاا باکتری ار بعضی خ محیطهای کشت دمایید 2- آزمايش ظرفيت مهار کنندگی محيط های کشت انتخابی پليتي مادند مكادكي رگار هوهپادسیون خولی رخ ب دسبت 1 به 11 ار درمای هالین یا رب مقطر خهتریل رقیق دمواه و مقدخر 50 µl یها 0/05 ml هوهپادسیون رقیق شده رخ ب محیط کشت مورا ر مایش نلقیح هر پلیت )CFU/plate( می باشد کنید برخی خجتناب خ رشد یاا باکتری ار بعضی خ خدتخابی ممکن خهت دیا باشد ک هوهپادسیون اه بار رقیق نر نهی شوا نعدخا کلنی های مورا خدتظار ار محیطهای کشت 3- آزمايش محيط های کشت لوله ای هر لول باید با 50 µl یا 0/05 ml خ هوهپادسیون خولی نهی شده مطابق با دیم مک فارلند )بدون رقیق ها ي( نلقیح شوا گاهی ممکن خهت ب نلقیح کمتر یا بیشتر دیا باشد محیط مورا ر مون رخ بعد خ نلقیح نحت شرخیطی ک ار جدوی 2 رمده خهت خدکوب دمایید ب طور درمای مان خدکوباهیون 58- یا هاعت ار امای 61±2 ºC می باشد محیط شکالت رگار و هایر محیط های کشت برخی جدخها ی خدتخابی گود های دیسریای بیماریزخ باید ار 50- %1 2 Co خدکوب شودد و ار فوخصل مادي هاعت وهپس هاعت بررهی گرادد برخی باكتري هاي بی هوخ ی کشتها عموما ب حدخقل 08 هاعت خدکوباهیون ار شهرخیط بهی ههوخ ی و غنهی خ Co 2 دیا اخردد ار مورا کمپیلوباکتر رگار پلیتها باید ار 02 ºC ار شرخیط میکرورئروفیلیک غنی خ Co 2 ب مدت 08 ههاعت خدکوب شودد 7

8 کنترل محيط های کشت براي آزمايشهاي بيوشيميايی خ هوهپادسیون میکروبی رقیق دشده برخی كنتری خین محیطها خهتفااه می کنیم پس خ نلقیح نمار کشت ها رخ ار شرخیط ال ر )خ دظر Co 2 رطوبهت و یها شهرخیط بیههوخ ی و ارجه حهرخرت مناههب( قهرخر اخاه و پهس خ طهی مهدت مهان ال ر )20 نها 08 ههاعت( ردهها رخ مهورا بررههی قهرخر مهی اههیم محیط های مناهب اخرخی رشد كافي خ کلنی های باکتریهاي مورا دظر مي باشند و ار مورا محیطهای خدتخهابی مهار میکروخرگادیسمهای مورا دظر باید مشخ باشد کنترل محيط های ساخته شده تجاری )آماده مصرف(: 5- رطوبت: محیطهای کشت باید بدون هر گود رطوبت خضافی بواه همچنهین ههیچ دشهاد خی خ شهک شهدن خطرخف محیط کشت دباید مشاهده گراا 2- هترون بوان: محیطهای کشت باید عاري خ رلواگی باشند ردگ: محیطهای کشت رگار ودهدخر دبایهد ههیچ دشهاد خی خ همهولیز اخشهت باشهند و محیطههای کشهت ایگهر دبایهد هیچگود نغییر ردگ غیر طبیعی اخشت باشند بررسی آلودگی محيط های کشت )استريل بودن محيط های کشت(: ار صورنیک نعدخا پلیت یا لول نهی شده ار هر هری ها ت یا Lot 500 عهدا یها کمتهر باشهد بایهد به نعهدخا %6-1 محیط هاي نهی شده رخ ار اماي ºC ب مدت 2-1 رو خدکوب دموا بهرخی Lot ههای بها نعهدخا بیش خ 500 باید ب نعدخا 50 پلیت یا لول رخ ب طور نصاافی براخشت و ار شرخیط فوق خدکوب دمهوا بعهد خ خدکوباهیون هیچ گود رشد میکروبی دباید مشاهده شوا تفسير نتاي : یک محیط کشت مادی قابل قبوی مهی باشهد که بها همه ههوی ههای پیشهنهاای بهرخی ر مهون محهیط کشهت که ار جدوی 2 مشخ شده خهت رشد کافی اخشت و صوصیات مورفولوژیكي کلنی ها بار باشد ار مهورا محهیط هههای خدتخههابی رشههد بعضههی خ خرگادیسههم هههای ههاص مهههار مههی شههوا ضههمن خینکهه خجهها ه رشههد کههافی بهه هایرخرگادیسم می اهد ار بعضی موخرا وخکنشهای ردگی اص یا همهولیز همچنادکه ار جهدوی 2 رمهده خههت باید خیجاا شوا مثال ار مورا کشت بالارگار خیجاا همولیز مناهب ضروری خهت و یا برخی محیط مکادکی رگهار خیجاا وخکنش های ردگی برخی هوی های میکروبی مشخ ضروری می باشد ساير معيارهای تضمين کيفيت: 8

9 11 9 محیطهای کشت رمااه مصرف باید خ دظرموخرا یر دیز بررهی شودد: شکستگی ظروف پتری پر شدن داصاف پلیتها نری وراگی محیط کشت ار پلیتها وجوا همولیز )برخی بالا رگار( اگی ی وجوا مقدخر یاا حباب یا حفره ار هطح محیط كشت جدول 2 محيط كشت بایل خهکولین رگار زمان انكوباسيون ارگانيسم های کنترلی نتيجه قابل انتظار خهترپتوکوی فکالیس.S faecalis خهترپتوکوی پایوژدز.S pyogenes خهترپتوکوی پایوژدز Streptococcus pyogenes بالا رگار جار شمع اخر CO 2 شکالت رگار خهترپتوکوی پنومودی.S pnemoniae هموفیلوس ردفلوخدزخ Haemophilus influenzae رشد محیط هیاهردگ می شوا رشد رشد اخرخی همولیزبتا رشد اخرخی همولیز رلفا رشد 08 هاعت الیزین اکربوکسیال )محیط بوهیل روغن خهتریل پوشادده میشوا( خوردیتین )اكربوكسیال ) شیگالفلکسنری Shigella flexneri کلبسیال پنومودی.K pneumoniae پرونئوس میرخبیلیس Proteus mirabilis باهیلوس هوبتیلیس Bacillus subtilis هیتروباکتر فروددی Citrobacter frundii 08 هاعت 08 هاعت ررژینین )ای هیدروال ) ژالنینا )بنفش ردگ می شوا( )بدون نغییر ردگ( گا + 2 A/A, SH کالیگلرریرون رگار گا یا بدون گا + 2 K/A, SH K/A شیگال فلکسنری Sh. flexneri نغییر دمی کند خهینتوباکتر کالکوهتیکوس Acinetobacter calcoaceticus 9

10 11 10 کلنی های قرمز ردگ پرونئوس میرخبیلیس Proteus mirabilis خهترپتوکوی فکالیس.S faecalis مک کادکی رگار )همرخه با کریستای ویول ) کلنی های بیردگ بدون هوخرمینگ ( زش( رشد )هبز ردگ( K. pneumonia مالودات کلبسیال پنومودی )ربی ردگ( کلنی های را ردگ خهتافیلوکوی خورئوس.S aureus.s epidermidis خهتافیلوكوك خپیدرمیدیس مادیتوی هالت رگار کلنی های قرمز ردگ رشد MR - VP MR - VP کلبسیال پنومودی K. pneumonia 08 هاعت MRVP خهتافیلوکوی خورئوس S. aureus ATCC مولرهینتون رگار هواوموداس رئروژینو خ P. aeruginosa ATCC خشرشیا کلی E. coli ATCC ب جدوی میزخن هال عدر رشد قابل قبوی ار بخش ردتی بیوگرخر مرخجع شوا دیترخت برخث رب پپتود )خددوی( فنیل رالدین ارمینا خهینتوبا کتر کالکوهتیکوس Acinetobacter calcoaceticus کلبسیال پنومودی.K pneumoniae پرونئوس میرخبیلیس P mirabilis هالمودال شیگال رگار )S.S( یا ا وکسی کالت هیترخت رگار هالمودال نایفی موریور Salmonella typhimurium کلنی های بیردگ کلنی های بیردگ یرهینیا خدتروکولیتیکا Yersinia enterocolitica هلنیت برخت )SF( هیمون هیترخت )ار لول های با ارپیچ شل ار شیگال فلکسنری Shigella flexneri کلنی های بیردگ بعد خ کشت مجدا رشد می کند بعد خ کشت مجدا رشد دمی کند رشد 08 هاعت 11

11 11 11 کلبسیال پنومودی.K pneumonia Vibrio SPP رشد - ردگ ربی کلنی های را ردگ خدكوبانور گذخشت شوا( TCBS رگار رشد دایسریا مننژیتیدیس Neisseria meningitidis (CO 2 ) دایسریا گودوره.N Gonorrhoeae نایر مارنین رشد رشد رشد گا + 2 A/A, SH باکتروئیدس فرخجیلیس Bacteriodes fragilis هیتروباکتر فروددی Citrobacter frundii نایوگلیکوالت برخث Thioglycollate broth گا یا بدون گا + 2 K/A, SH K/A شیگال فلکسنری Sh. flexneri TSI عمق محیط باید 6 هادتی متر باشد )با ارپیچ شل خنوو گذخری شوا( محیط خوره خهینتوباکتر کالکوهتیکوس Acinetobacter calcoaceticus نغییر دمی کند صورنی پرونئوس میرخبیلیس.P mirabilis منابع : 1- Quality Assurance for commercially prepared Microbiological Culture Media- Second Edition ; Approved standard.- Third edition document M22-A3. Vol. 24 No.19; Oxoid company- General Guide to the use of Oxoid culture Media. 6- محیط هاي كشت ر مایشگاهي )موخرا مصرف وكنتری كیفي( ب خدضمار خطلس ردگي محیط هاي كشت گرا روري و نرجم مهنا صارمي محمد علي صارمي ر مایشگاه مرجع هالمت و خرت بهدخشت ارمان ورمو ش پزشكي